תאי ACHN
Cell line · Product number 300117
The ACHN cell line is derived from the malignant pleural effusion of a 22-year-old Caucasian male with widely metastatic renal adenocarcinoma. The cell li...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים ACHN נגזר מהצטברות נוזלים ממאירה בחלל הצדר של גבר לבן בן 22 עם אדנוקרצינומה כלייתית גרורתית נרחבת. קו התאים הוקם בנובמבר 1979, לאחר זריעה ישירה של תאי הסרטן לתוך צלוחיות תרבית המכילות Eagle's MEM עם 10% FBS. במשך תקופה של 150 יום, התאים הוחזקו והועברו במבחנה. לאחר מכן, התאים הוחדר תת-עורית לעכברים עירומים, שם הם יצרו גידולים מוחשיים ופולשניים מקומית בתוך ארבעה שבועות. קו תאים זה הוא טומורגני, כפי שמעידה יכולתו לגרום לגידולים ב-100% מהעכברים העירומים (5/5) שהוחדר להם 107 תאים, עם התפתחות גידולים בתוך 21 יום.
תאי ACHN מאופיינים בדפוס גדילה דבק ומבטאים איזואנזימים ספציפיים, כולל G6PD (סוג B). קו תאים זה ידוע גם בתגובתו לאינטרפרונים אנושיים ולמגבירי אינטרפרון, מה שהופך אותו לשימושי במיוחד במחקרים אנטי-פרוליפרטיביים. הן תאי ACHN המקוריים והן אלה שהוחזרו מגידולים בעכברים עירומים מפגינים עיכוב גדילה בנוכחות אינטרפרונים אנושיים, מה שמדגיש את היישום הפוטנציאלי שלהם במחקרים הבוחנים את היעילות של טיפולים מבוססי אינטרפרון לסרטן הכליה.
קו התאים ACHN הוא כלי חשוב למחקר הסרטן, במיוחד בהקשר של אדנוקרצינומה של הכליה. הוא משמש מודל חשוב לחקר תכונות הגידול, התנהגות גרורתית והשפעות האינטרפרונים על התרבות תאי הסרטן. יכולתו ליצור גידולים in vivo ולהגיב לטיפול באינטרפרון מספקת פלטפורמה איתנה לפיתוח ולבדיקה של גישות טיפוליות חדשות המכוונות לקרצינומה של תאי הכליה.
- Tissue
- כליה
- Disease
- אדנוקרצינומה
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Tumourigenic
- כן, בעכברים עירומים
- Doubling time
- 30 שעות
04Identifiers
- Citation
- ACHN (מספר קטלוגי Cytion 300117)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1067
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- CAIx- (אנזים פחמן דו-חמצני Ix)
- Protein expression
- P53 חיובי
- Isoenzymes
- CAIx-
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 x 104 תאים/סמ"ר יניבו שכבה חד-תאית מלוכדת תוך 4 ימים.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 22 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)