Skip to content
תאי ACHN
Tissue
כליה
Disease
אדנוקרצינומה

Documents

תאי ACHN

Cell line · Product number 300117

The ACHN cell line is derived from the malignant pleural effusion of a 22-year-old Caucasian male with widely metastatic renal adenocarcinoma. The cell li...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים ACHN נגזר מהצטברות נוזלים ממאירה בחלל הצדר של גבר לבן בן 22 עם אדנוקרצינומה כלייתית גרורתית נרחבת. קו התאים הוקם בנובמבר 1979, לאחר זריעה ישירה של תאי הסרטן לתוך צלוחיות תרבית המכילות Eagle's MEM עם 10% FBS. במשך תקופה של 150 יום, התאים הוחזקו והועברו במבחנה. לאחר מכן, התאים הוחדר תת-עורית לעכברים עירומים, שם הם יצרו גידולים מוחשיים ופולשניים מקומית בתוך ארבעה שבועות. קו תאים זה הוא טומורגני, כפי שמעידה יכולתו לגרום לגידולים ב-100% מהעכברים העירומים (5/5) שהוחדר להם 107 תאים, עם התפתחות גידולים בתוך 21 יום.

תאי ACHN מאופיינים בדפוס גדילה דבק ומבטאים איזואנזימים ספציפיים, כולל G6PD (סוג B). קו תאים זה ידוע גם בתגובתו לאינטרפרונים אנושיים ולמגבירי אינטרפרון, מה שהופך אותו לשימושי במיוחד במחקרים אנטי-פרוליפרטיביים. הן תאי ACHN המקוריים והן אלה שהוחזרו מגידולים בעכברים עירומים מפגינים עיכוב גדילה בנוכחות אינטרפרונים אנושיים, מה שמדגיש את היישום הפוטנציאלי שלהם במחקרים הבוחנים את היעילות של טיפולים מבוססי אינטרפרון לסרטן הכליה.

קו התאים ACHN הוא כלי חשוב למחקר הסרטן, במיוחד בהקשר של אדנוקרצינומה של הכליה. הוא משמש מודל חשוב לחקר תכונות הגידול, התנהגות גרורתית והשפעות האינטרפרונים על התרבות תאי הסרטן. יכולתו ליצור גידולים in vivo ולהגיב לטיפול באינטרפרון מספקת פלטפורמה איתנה לפיתוח ולבדיקה של גישות טיפוליות חדשות המכוונות לקרצינומה של תאי הכליה.

Tissue
כליה
Disease
אדנוקרצינומה

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים
Doubling time
30 שעות

04Identifiers

Citation
ACHN (מספר קטלוגי Cytion 300117)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1067

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
CAIx- (אנזים פחמן דו-חמצני Ix)
Protein expression
P53 חיובי
Isoenzymes
CAIx-

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר יניבו שכבה חד-תאית מלוכדת תוך 4 ימים.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
22 שנים
Ethnicity
קווקזי