Pāriet uz saturu
ACHN šūnas
Audums
Nieres
Slimība
Adenokarcinoma

Dokumenti

ACHN šūnas

Cell line · Preces numurs 300117

ACHN šūnu līnija ir iegūta no 22 gadus veca kaukāziešu izcelsmes vīrieša ļaundabīgā pleiras izsvīduma, kuram bija plaši metastāzējusi nieru adenokarcinoma. Šūnu līnija...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

ACHN šūnu līnija ir iegūta no 22 gadus veca kaukāzieša ar plaši metastātisku nieru adenokarcinomu ļaundabīgā pleiras izsvīduma. Šūnu līnija tika izveidota 1979. gada novembrī, pēc vēža šūnu tiešas iesēšanas kultūras kolbās, kas saturēja Eagle's MEM ar 10 % FBS. 150 dienu laikā šūnas tika uzturētas un pārnestas in vitro. Pēc tam šūnas tika subkutāni inokulētas kailām pelēm, kur tās četru nedēļu laikā veidoja taustāmus, lokāli invazīvus audzējus. Šī šūnu līnija ir tumorogēna, ko pierāda tās spēja izraisīt audzējus 100 % kailām pelēm (5/5), kurām tika inokulētas 107 šūnas, un audzēji attīstījās 21 dienu laikā.

ACHN šūnas raksturo adhezīvs augšanas modelis un tās ekspresē specifiskus izoenzīmus, tostarp G6PD (B tips). Šī šūnu līnija ir pazīstama arī ar savu reakciju uz cilvēka interferoniem un interferonu induktoriem, kas to padara īpaši noderīgu antiproliferatīvos pētījumos. Gan sākotnējās ACHN šūnas, gan tās, kas atgūtas no audzējiem kailām pelēm, demonstrē augšanas inhibīciju cilvēka interferonu klātbūtnē, uzsverot to potenciālo pielietojumu pētījumos, kuros izpēta interferonu terapijas efektivitāti nieru vēža ārstēšanā.

ACHN šūnu līnija ir vērtīgs instruments vēža pētījumos, īpaši saistībā ar nieru adenokarcinomu. Tā kalpo kā svarīgs modelis, lai pētītu tumorigenitāti, metastāzes un interferonu ietekmi uz vēža šūnu proliferāciju. Tās spēja veidot audzējus in vivo un reaģēt uz interferonu terapiju nodrošina stabilu platformu jaunu terapeitisko pieeju izstrādei un testēšanai, kas vērstas uz nieru šūnu karcinomu.

Audums
Nieres
Slimība
Adenokarcinoma

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
30 stundas

04Identifikatori

Atsauce
ACHN (Cytion kataloga numurs 300117)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1067

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
CAIx- (karbonanhidrāze Ix)
Proteīnu ekspresija
P53 pozitīvs
Izoenzīmi
CAIx-

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2 4 dienu laikā izveidosies konfluents monoslānis.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
22 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis