Siirry sisältöön
ACHN-solut
Kudos
Munuaiset
Sairaus
Adenokarsinooma

Asiakirjat

ACHN-solut

Cell line · Tuotenumero 300117

ACHN-solulinja on peräisin 22-vuotiaan valkoihoisen miehen pahanlaatuisesta keuhkopussin nestekertymästä, jolla oli laajalle levinnyt munuaisten adenokarsinooma. Solulinja...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

ACHN-solulinja on peräisin 22-vuotiaan valkoihoisen miehen pahanlaatuisesta pleuraeffuusiosta, jolla oli laajalle levinnyt munuaisten adenokarsinooma. Solulinja perustettiin marraskuussa 1979, kun syöpäsolut siirrostettiin suoraan viljelypulloihin, jotka sisälsivät Eagle's MEM -kasvatusainetta ja 10 % FBS:ää. Soluja ylläpidettiin ja siirrostettiin in vitro 150 päivän ajan. Sen jälkeen solut siirrostettiin ihonalaisesti alastomille hiirille, joissa ne muodostivat neljän viikon kuluessa tunnusteltavia, paikallisesti invasiivisia kasvaimia. Tämä solulinja on tuumorigeeninen, mikä näkyy sen kyvyssä indusoida kasvaimia 100 %:ssa alastomista hiiristä (5/5), joille siirrostettiin 107 solua ja joissa kasvaimet kehittyivät 21 päivän kuluessa.

ACHN-soluille on ominaista adheesioinen kasvumalli, ja ne ilmentävät tiettyjä isoentsyymejä, kuten G6PD (tyyppi B). Tämä solulinja on tunnettu myös reaktiostaan ihmisen interferoneihin ja interferonien indusoijiin, mikä tekee siitä erityisen hyödyllisen antiproliferatiivisten tutkimusten kannalta. Sekä alkuperäiset ACHN-solut että alastomista hiiristä peräisin olevat kasvaimista talteen otetut solut osoittavat kasvun estymistä ihmisen interferonien läsnä ollessa, mikä korostaa niiden potentiaalista käyttöä tutkimuksissa, joissa tutkitaan interferonipohjaisten hoitojen tehoa munuaissyövän hoidossa.

ACHN-solulinja on arvokas työkalu syöpätutkimuksessa, erityisesti munuaisten adenokarsinooman yhteydessä. Se toimii tärkeänä mallina tutkiessa tuumorigeenisyyttä, metastaattista käyttäytymistä ja interferonien vaikutuksia syöpäsolujen proliferaatioon. Sen kyky muodostaa kasvaimia in vivo ja reagoida interferonihoitoon tarjoaa vankan alustan munuaissolukarsinoomaa koskevien uusien terapeuttisten lähestymistapojen kehittämiselle ja testaamiselle.

Kudos
Munuaiset
Sairaus
Adenokarsinooma

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä
Kaksinkertaistumisaika
30 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
ACHN (Cytionin luettelonumero 300117)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1067

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
CAIx- (hiilihappoanhydraasi Ix)
Proteiinin ilmentyminen
P53-positiivinen
Isoentsyymit
CAIx-

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2 tuottaa yhtenäisen yksikerroksen 4 päivän kuluessa.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
22 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen