الانتقال إلى المحتوى
خلايا ACHN
الأنسجة
الكلى
المرض
السرطان الغدي

المستندات

خلايا ACHN

Cell line · رقم المنتج 300117

تم استخلاص خط الخلايا ACHN من الانصباب الجنبي الخبيث لمريض ذكر قوقازي يبلغ من العمر 22 عامًا يعاني من سرطان غدي كلوي منتشر على نطاق واسع. خط الخلايا...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

سلسلة الخلايا ACHN مشتقة من الانصباب الجنبي الخبيث لرجل قوقازي يبلغ من العمر 22 عامًا مصاب بسرطان غدي كلوي منتشر على نطاق واسع. تم إنشاء سلسلة الخلايا في نوفمبر 1979، بعد زرع الخلايا السرطانية مباشرة في قوارير استزراع تحتوي على MEM من Eagle مع 10٪ FBS. على مدى 150 يومًا، تمت صيانة الخلايا وتمريرها في المختبر. بعد ذلك، تم تلقيح الخلايا تحت الجلد في فئران عارية، حيث شكلت أورامًا محسوسة ومتفشية محليًا في غضون أربعة أسابيع. هذا الخط الخلوي مسبب للأورام، كما يتضح من قدرته على إحداث أورام في 100٪ من الفئران العارية (5/5) التي تم تلقيحها بـ 107 خلية، مع تطور الأورام في غضون 21 يومًا.

تتميز خلايا ACHN بنمط نمو ملتصق وتعبر عن إنزيمات متماثلة محددة، بما في ذلك G6PD (النوع B). يُعرف هذا الخط الخلوي أيضًا باستجابته للإنترفيرون البشري ومحفزات الإنترفيرون، مما يجعله مفيدًا بشكل خاص للدراسات المضادة للتكاثر. تظهر كل من خلايا ACHN الأصلية وتلك المستخرجة من الأورام في الفئران العارية تثبيطًا للنمو في وجود الإنترفيرون البشري، مما يسلط الضوء على تطبيقاتها المحتملة في الدراسات التي تستكشف فعالية العلاجات القائمة على الإنترفيرون لسرطان الكلى.

تعد سلالة الخلايا ACHN أداة قيّمة لأبحاث السرطان، خاصة في سياق سرطان الغدة الكلوية. وهي بمثابة نموذج مهم لدراسة التسرطن والسلوك النقيلي وتأثيرات الإنترفيرونات على تكاثر الخلايا السرطانية. توفر قدرتها على تكوين أورام في الجسم الحي والاستجابة للعلاج بالإنترفيرون منصة قوية لتطوير واختبار مناهج علاجية جديدة تستهدف سرطان الخلايا الكلوية.

الأنسجة
الكلى
المرض
السرطان الغدي

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية
زمن المضاعفة
30 ساعة

04المعرّفات

المرجع
ACHN (كتالوج سايتون رقم الكتالوج 300117)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1067

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
CAIx- (الأنهيدراز الكربونيك الأنهيدراز Ix)
التعبير البروتيني
P53 إيجابي
الإيزوزيمات
CAIx-

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2 ستؤدي إلى طبقة أحادية متقاربة في غضون 4 أيام.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
22 سنة
الأصل العرقي
قوقازي