Přejít na obsah
Buňky ACHN
Tkáň
Ledviny
Nemoc
Adenokarcinom

Dokumenty

Buňky ACHN

Cell line · Číslo výrobku 300117

Buněčná linie ACHN byla izolována z maligního pleurálního výpotku 22letého muže kavkazského původu s rozsáhlými metastázami adenokarcinomu ledvin. Buněčná linie...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie ACHN pochází z maligního pleurálního výpotku 22letého bělošského muže s rozsáhlým metastatickým adenokarcinomem ledvin. Buněčná linie byla založena v listopadu 1979 po přímém nasazení rakovinných buněk do kultivačních lahví obsahujících Eagle's MEM s 10 % FBS. Po dobu 150 dnů byly buňky udržovány a pasážovány in vitro. Následně byly buňky subkutánně naočkovány nahým myším, kde během čtyř týdnů vytvořily hmatatelné, lokálně invazivní nádory. Tato buněčná linie je tumorigenní, o čemž svědčí její schopnost indukovat nádory u 100 % nahých myší (5/5) naočkovaných 107 buňkami, přičemž nádory se vyvinuly do 21 dnů.

Buňky ACHN se vyznačují adhezivním růstovým vzorcem a exprimují specifické izoenzymy, včetně G6PD (typ B). Tato buněčná linie je také známá svou reakcí na lidské interferony a induktory interferonu, což ji činí obzvláště užitečnou pro antiproliferační studie. Jak původní buňky ACHN, tak buňky získané z nádorů nahých myší vykazují inhibici růstu v přítomnosti lidských interferonů, což zdůrazňuje jejich potenciální použití ve studiích zkoumajících účinnost terapií založených na interferonu pro rakovinu ledvin.

Buněčná linie ACHN je cenným nástrojem pro výzkum rakoviny, zejména v kontextu adenokarcinomu ledvin. Slouží jako důležitý model pro studium tumorigenicity, metastatického chování a účinků interferonů na proliferaci rakovinných buněk. Její schopnost tvořit nádory in vivo a reagovat na léčbu interferonem poskytuje robustní platformu pro vývoj a testování nových terapeutických přístupů zaměřených na karcinom ledvinových buněk.

Tkáň
Ledviny
Nemoc
Adenokarcinom

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Ano, u nahých myší
Doba zdvojnásobení
30 hodin

04Identifikátory

Citace
ACHN (katalogové číslo Cytion 300117)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1067

05Exprese a náchylnost

Exprimované receptory
CAIx- (karboanhydráza Ix)
Exprese proteinů
P53 pozitivní
Isoenzymy
CAIx-

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2 vytvoří konfluentní monovrstvu během 4 dnů.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
22 let
Etnická příslušnost
Kavkazský