Gå direkte til indholdet
ACHN-celler
Væv
Nyre
Sygdom
Adenokarcinom

Dokumenter

ACHN-celler

Cell line · Varenummer 300117

ACHN-cellelinjen stammer fra den maligne pleuralvæske hos en 22-årig kaukasisk mand med udbredt metastatisk nyreadenokarcinom. Cellelinjen...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

ACHN-cellelinjen stammer fra malign pleural effusion hos en 22-årig kaukasisk mand med bredt metastatisk renal adenocarcinom. Cellelinjen blev etableret i november 1979 efter direkte udsåning af kræftcellerne i kulturflasker indeholdende Eagle's MEM med 10 % FBS. Over en periode på 150 dage blev cellerne opbevaret og passageret in vitro. Derefter blev cellerne podet subkutant i nude-mus, hvor de dannede palpable, lokalt invasive tumorer inden for fire uger. Denne cellelinje er tumorigen, hvilket fremgår af dens evne til at inducere tumorer i 100 % af nude-mus (5/5), der blev podet med 107 celler, hvor tumorer udviklede sig inden for 21 dage.

ACHN-celler er kendetegnet ved et adhærent vækstmønster og udtrykker specifikke isoenzymer, herunder G6PD (type B). Denne cellelinje er også kendt for sin reaktion på humane interferoner og interferoninducerende stoffer, hvilket gør den særligt anvendelig til antiproliferative studier. Både de oprindelige ACHN-celler og de celler, der er udvundet fra tumorer i nude-mus, udviser væksthæmning i nærværelse af humane interferoner, hvilket understreger deres potentielle anvendelse i studier, der undersøger effektiviteten af interferonbaserede terapier mod nyrekræft.

ACHN-cellelinjen er et værdifuldt redskab til kræftforskning, især i forbindelse med nyreadenokarcinom. Den fungerer som en vigtig model til undersøgelse af tumorigenicitet, metastatisk adfærd og interferoners virkning på kræftcellers proliferation. Dens evne til at danne tumorer in vivo og reagere på interferonbehandling udgør en robust platform for udvikling og afprøvning af nye terapeutiske tilgange rettet mod nyrecellekarcinom.

Væv
Nyre
Sygdom
Adenokarcinom

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus
Fordoblingstid
30 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
ACHN (Cytion katalognummer 300117)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1067

05Udtryk og modtagelighed

Udtrykte receptorer
CAIx- (kulsyreanhydrase Ix)
Proteinekspression
P53-positiv
Isoenzymer
CAIx-

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2 vil resultere i et sammenhængende monolag inden for 4 dage.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
22 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk