İçeriğe atla
ACHN Hücreleri
Doku
Böbrek
Hastalık
Adenokarsinom

ACHN Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300117

ACHN hücre hattı, yaygın metastazlı böbrek adenokarsinomu olan 22 yaşındaki Kafkas erkek hastanın malign plevral efüzyonundan elde edilmiştir. Hücre hattı...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

ACHN hücre hattı, yaygın metastatik renal adenokarsinomlu 22 yaşındaki Kafkas erkek hastanın malign plevral efüzyonundan elde edilmiştir. Hücre hattı, kanser hücrelerinin %10 FBS içeren Eagle's MEM içeren kültür şişelerine doğrudan ekilmesinden sonra Kasım 1979'da kurulmuştur. 150 gün boyunca hücreler in vitro olarak muhafaza edildi ve pasajlandı. Daha sonra hücreler çıplak farelere deri altına aşılandı ve dört hafta içinde elle hissedilebilir, lokal invaziv tümörler oluşturdu. Bu hücre hattı, 107 hücre ile aşılanan çıplak farelerin %100'ünde (5/5) 21 gün içinde tümörler gelişmesi ile kanıtlandığı üzere tümörojeniktir.

ACHN hücreleri, yapışkan bir büyüme paterni ile karakterize edilir ve G6PD (tip B) dahil olmak üzere spesifik izoenzimler eksprese eder. Bu hücre hattı, insan interferonlarına ve interferon indükleyicilerine verdiği tepkiyle de dikkat çeker ve bu özelliği onu antiproliferatif çalışmalar için özellikle yararlı kılar. Hem orijinal ACHN hücreleri hem de çıplak farelerin tümörlerinden elde edilen hücreler, insan interferonlarının varlığında büyüme inhibisyonu gösterir ve bu da böbrek kanseri için interferon bazlı tedavilerin etkinliğini araştıran çalışmalarda potansiyel uygulamalarını vurgular.

ACHN hücre hattı, özellikle böbrek adenokarsinomu bağlamında kanser araştırmaları için değerli bir araçtır. Tümör oluşumu, metastatik davranış ve interferonların kanser hücresi proliferasyonu üzerindeki etkilerini incelemek için önemli bir model görevi görür. In vivo olarak tümör oluşturma ve interferon tedavisine yanıt verme yeteneği, böbrek hücreli karsinomu hedefleyen yeni terapötik yaklaşımlar geliştirmek ve test etmek için sağlam bir platform sağlar.

Doku
Böbrek
Hastalık
Adenokarsinom

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde
İki katına çıkma süresi
30 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
ACHN (Cytion katalog numarası 300117)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1067

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
CAIx- (karbonik anhidraz Ix)
Protein ekspresyonu
P53 pozitif
İzoenzimler
CAIx-

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2, 4 gün içinde birleşik tek tabaka oluşturacaktır.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
22 yıl
Etnik köken
Kafkas