Mine otse sisu juurde
ACHN rakud
Kude
Neerud
Haigus
Adenokartsinoom

Dokumendid

ACHN rakud

Cell line · Toote number 300117

ACHN-rakuliin on saadud 22-aastase kaukaasia päritolu mehe pahaloomulisest pleuraefusioonist, kellel oli laialdaselt metastaasidega neerude adenokartsinoom. Rakuliin...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

ACHN rakuliin on saadud 22-aastase valge mehe pahaloomulisest pleuraefusioonist, kellel oli laialt metastaasidega neeru adenokartsinoom. Rakuliin loodi 1979. aasta novembris, pärast vähirakkude otsest külvamist kultuurikolbidesse, mis sisaldasid Eagle'i MEM-i 10% FBS-iga. 150 päeva jooksul hoiti rakke ja paljundati neid in vitro. Seejärel siirdati rakud naha alla alasti hiirtele, kus nad moodustasid nelja nädala jooksul palpeeritavad, lokaalselt invasiivsed kasvajad. See rakuliin on tuumorigeenne, mida tõendab tema võime indutseerida kasvajaid 100% alasti hiirtel (5/5), kellele siirdati 107 rakku, kusjuures kasvajad arenesid 21 päeva jooksul.

ACHN-rakke iseloomustab adhesiivne kasvumuster ja need ekspresseerivad spetsiifilisi isoensüüme, sealhulgas G6PD (tüüp B). See rakuliin on tuntud ka oma reaktsiooni poolest inimese interferoonidele ja interferooni indutseerijatele, mis muudab selle eriti kasulikuks antiproliferatiivsetes uuringutes. Nii originaalsed ACHN-rakud kui ka alasti hiirtelt kasvajatest taastatud rakud näitavad inimese interferoonide juuresolekul kasvu pärssimist, mis rõhutab nende potentsiaalset rakendatavust uuringutes, mis uurivad interferoonipõhiste ravimeetodite efektiivsust neeruvähi puhul.

ACHN-rakuliin on väärtuslik vahend vähiuuringutes, eriti neeru adenokartsinoomi kontekstis. See on oluline mudel kasvajate tekke, metastaaside käitumise ja interferoonide mõju uurimiseks vähirakkude proliferatsioonile. Selle võime moodustada kasvajaid in vivo ja reageerida interferoonravile pakub tugeva platvormi neerurakk-kartsinoomi suunatud uute ravivõimaluste arendamiseks ja katsetamiseks.

Kude
Neerud
Haigus
Adenokartsinoom

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel
Kahekordistumisaeg
30 tundi

04Tunnused

Viide
ACHN (Cytioni katalooginumber 300117)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1067

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
CAIx- (karboanhüdraas Ix)
Valgu ekspressioon
P53 positiivne
Isoensüümid
CAIx-

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 annab 4 päeva jooksul konfluentse monokihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
22 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia