Tế bào ACHN
Cell line · Product number 300117
The ACHN cell line is derived from the malignant pleural effusion of a 22-year-old Caucasian male with widely metastatic renal adenocarcinoma. The cell li...
Customization / Recommendations
- Tế bào ACHNCell line€430.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
Dòng tế bào ACHN được phân lập từ dịch màng phổi ác tính của một nam giới da trắng 22 tuổi bị ung thư thận dạng adenocarcinoma di căn rộng rãi. Dòng tế bào này được thiết lập vào tháng 11 năm 1979, sau khi gieo trực tiếp các tế bào ung thư vào bình nuôi cấy chứa dung dịch Eagle's MEM với 10% huyết thanh bò (FBS). Trong vòng 150 ngày, các tế bào được duy trì và nhân lên trong ống nghiệm. Sau đó, các tế bào được tiêm dưới da vào chuột nude, nơi chúng hình thành các khối u có thể sờ thấy, xâm lấn cục bộ trong vòng bốn tuần. Dòng tế bào này có khả năng gây ung thư, được chứng minh bằng khả năng gây khối u ở 100% chuột nude (5/5) được tiêm 10⁷ tế bào, với khối u phát triển trong vòng 21 ngày.
Các tế bào ACHN có đặc điểm là mô hình tăng trưởng bám dính và biểu hiện các isoenzyme cụ thể, bao gồm G6PD (loại B). Dòng tế bào này cũng được chú ý vì phản ứng với interferon người và các chất kích thích interferon, làm cho nó đặc biệt hữu ích cho các nghiên cứu chống tăng sinh. Cả các tế bào ACHN ban đầu và những tế bào được thu hồi từ khối u ở chuột nude đều cho thấy ức chế tăng trưởng khi có mặt interferon người, nhấn mạnh tiềm năng ứng dụng của chúng trong các nghiên cứu đánh giá hiệu quả của liệu pháp dựa trên interferon cho ung thư thận.
Dòng tế bào ACHN là công cụ quý giá cho nghiên cứu ung thư, đặc biệt trong bối cảnh ung thư tuyến thận. Nó đóng vai trò quan trọng trong việc nghiên cứu tính gây ung thư, hành vi di căn và tác động của interferon đối với sự tăng sinh của tế bào ung thư. Khả năng hình thành khối u trong cơ thể và phản ứng với điều trị interferon cung cấp nền tảng vững chắc cho việc phát triển và thử nghiệm các phương pháp điều trị mới nhắm vào ung thư tế bào thận.
- Tissue
- Thận
- Disease
- Ung thư biểu mô tuyến
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Tương tự biểu mô
- Tumourigenic
- Đúng vậy, ở chuột nude
- Doubling time
- 30 giờ
04Identifiers
- Citation
- ACHN (Số catalog Cytion 300117)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1067
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- CAIx- (enzyme carbonic anhydrase Ix)
- Protein expression
- P53 dương tính
- Isoenzymes
- CAIx-
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), chứa: 2 mM L-Glutamine, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃, chứa: EBSS (Số hiệu sản phẩm Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.
- Supplements
- Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò phôi (FBS) và 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
- Seeding density
- 1 x 10⁴ tế bào/cm² sẽ tạo thành một lớp đơn liên tục trong vòng 4 ngày.
- Fluid renewal
- 2 đến 3 lần mỗi tuần
- Post-thaw recovery
- Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.
Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.
- Freeze medium
- Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
- Storage conditions
Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.
- Shipping conditions
Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.
08Donor
- Donor age
- 22 năm
- Ethnicity
- Người da trắng
09Legal and safety
- Safety precautions
- Khi lập kế hoạch lưu trữ ống cryovial trong nitơ lỏng để rã đông sau này, việc tuân thủ các biện pháp an toàn nghiêm ngặt là bắt buộc. Găng tay và quần áo bảo hộ phù hợp là điều cần thiết, và việc sử dụng khẩu trang hoặc kính bảo hộ là bắt buộc trong quá trình chuyển mẫu đông lạnh vào hoặc ra khỏi bể nitơ lỏng. Điều này nhằm giảm thiểu nguy cơ chấn thương do nổ ống cryovial khi lấy ra, có thể dẫn đến việc văng ra các mảnh vỡ sắc nhọn.
- Warranty
Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.
Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)