Ga naar de inhoud
ACHN-cellen
Weefsel
Nieren
Ziekte
Adenocarcinoom

Documenten

ACHN-cellen

Cell line · Productnummer 300117

De ACHN-cellijn is afkomstig van de kwaadaardige pleurale effusie van een 22-jarige blanke man met een wijdverspreid gemetastaseerd nieradenocarcinoom. De cellijn...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De ACHN-cellijn is afkomstig van de kwaadaardige pleurale effusie van een 22-jarige blanke man met wijdverspreide gemetastaseerde nieradenocarcinoom. De cellijn werd in november 1979 opgericht, na directe zaaiing van de kankercellen in kweekflessen met Eagle's MEM met 10% FBS. Gedurende een periode van 150 dagen werden de cellen in vitro gekweekt en gepasseerd. Vervolgens werden de cellen subcutaan geïnoculeerd in naakte muizen, waar ze binnen vier weken voelbare, lokaal invasieve tumoren vormden. Deze cellijn is tumorigenisch, zoals blijkt uit het vermogen om tumoren te induceren bij 100% van de naakte muizen (5/5) die met 107 cellen werden geïnoculeerd, waarbij de tumoren zich binnen 21 dagen ontwikkelden.

ACHN-cellen worden gekenmerkt door een adherent groeipatroon en brengen specifieke iso-enzymen tot expressie, waaronder G6PD (type B). Deze cellijn staat ook bekend om zijn reactie op menselijke interferonen en interferoninducers, waardoor hij bijzonder nuttig is voor antiproliferatieve studies. Zowel de oorspronkelijke ACHN-cellen als de cellen die uit tumoren in naakte muizen zijn teruggewonnen, vertonen groeiremming in aanwezigheid van menselijke interferonen, wat hun potentiële toepassing benadrukt in studies naar de werkzaamheid van op interferon gebaseerde therapieën voor nierkanker.

De ACHN-cellijn is een waardevol hulpmiddel voor kankeronderzoek, met name in de context van nieradenocarcinoom. Het dient als een belangrijk model voor het bestuderen van tumorigeniciteit, metastatisch gedrag en de effecten van interferonen op de proliferatie van kankercellen. Het vermogen om in vivo tumoren te vormen en te reageren op interferonbehandeling biedt een robuust platform voor het ontwikkelen en testen van nieuwe therapeutische benaderingen gericht op niercelcarcinoom.

Weefsel
Nieren
Ziekte
Adenocarcinoom

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
Ja, in naakte muizen
Verdubbelingstijd
30 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
ACHN (Cytion catalogusnummer 300117)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1067

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
CAIx- (koolzuuranhydrase Ix)
Eiwit-expressie
P53-positief
Iso-enzymen
CAIx-

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2 resulteert binnen 4 dagen in een confluente monolaag.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
22 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch