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Cellules ACHN
Tissue
Rein
Disease
Adénocarcinome

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Cellules ACHN

Cell line · Product number 300117

The ACHN cell line is derived from the malignant pleural effusion of a 22-year-old Caucasian male with widely metastatic renal adenocarcinoma. The cell li...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

La lignée cellulaire ACHN provient de l'épanchement pleural malin d'un homme de race blanche âgé de 22 ans atteint d'un adénocarcinome rénal largement métastatique. La lignée cellulaire a été établie en novembre 1979, à la suite de l’ensemencement direct des cellules cancéreuses dans des flacons de culture contenant du milieu MEM d’Eagle additionné de 10 % de sérum fœtal bovin (FBS). Pendant une période de 150 jours, les cellules ont été maintenues et repiquées in vitro. Par la suite, les cellules ont été inoculées par voie sous-cutanée à des souris nues, chez lesquelles elles ont formé des tumeurs palpables et localement invasives en moins de quatre semaines. Cette lignée cellulaire est tumorigène, comme en témoigne sa capacité à induire des tumeurs chez 100 % des souris nues (5/5) inoculées avec 10⁷ cellules, les tumeurs se développant en moins de 21 jours.

Les cellules ACHN se caractérisent par un mode de croissance adhérent et expriment des isoenzymes spécifiques, notamment la G6PD (type B). Cette lignée cellulaire se distingue également par sa réponse aux interférons humains et aux inducteurs d’interféron, ce qui la rend particulièrement utile pour les études antiprolifératives. Tant les cellules ACHN d’origine que celles récupérées à partir de tumeurs chez des souris nues présentent une inhibition de la croissance en présence d’interférons humains, ce qui souligne leur application potentielle dans les études explorant l’efficacité des thérapies à base d’interféron pour le cancer du rein.

La lignée cellulaire ACHN constitue un outil précieux pour la recherche sur le cancer, en particulier dans le contexte de l’adénocarcinome rénal. Elle sert de modèle important pour l’étude de la tumorigénicité, du comportement métastatique et des effets des interférons sur la prolifération des cellules cancéreuses. Sa capacité à former des tumeurs in vivo et à répondre au traitement par interféron offre une plateforme solide pour le développement et l’évaluation de nouvelles approches thérapeutiques ciblant le carcinome rénal.

Tissue
Rein
Disease
Adénocarcinome

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De type épithélial
Tumourigenic
Oui, chez les souris nues
Doubling time
30 heures

04Identifiers

Citation
ACHN (numéro de catalogue Cytion 300117)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1067

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
CAIx- (anhydrase carbonique Ix)
Protein expression
P53 positif
Isoenzymes
CAIx-

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), contenant : 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, et EBSS (référence Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter au milieu 10 % de FBS et 1 % de NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Seeding density
Une densité de 1 × 10⁴ cellules/cm² permettra d'obtenir une monocouche confluente en 4 jours.
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Post-thaw recovery
Après décongélation, ensemencer les cellules à une densité de 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
22 ans
Ethnicity
caucasien