Премини към съдържанието
ACHN клетки
Тъкан
Бъбреци
Заболяване
Аденокарцином

Документи

ACHN клетки

Cell line · Номер на продукта 300117

Клетъчната линия ACHN е получена от злокачествен плеврален излив при 22-годишен мъж от кавказката раса с широко метастазирал аденокарцином на бъбреците. Клетъчната линия...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия ACHN е получена от злокачествен плеврален излив на 22-годишен мъж от кавказки произход с широко метастатичен бъбречен аденокарцином. Клетъчната линия е създадена през ноември 1979 г. след директно засяване на раковите клетки в културални колби, съдържащи Eagle's MEM с 10% FBS. В продължение на 150 дни клетките са поддържани и прехвърляни in vitro. Впоследствие клетките са инокулирани подкожно в голи мишки, където са образували осезаеми, локално инвазивни тумори в рамките на четири седмици. Тази клетъчна линия е туморогенна, както се доказва от способността ѝ да предизвиква тумори в 100% от голите мишки (5/5), инокулирани с 107 клетки, като туморите се развиват в рамките на 21 дни.

ACHN клетките се характеризират с адхезивен растежен модел и експресират специфични изоензими, включително G6PD (тип B). Тази клетъчна линия е известна и с реакцията си към човешки интерферони и индуктори на интерферон, което я прави особено полезна за антипролиферативни изследвания. Както оригиналните ACHN клетки, така и тези, възстановени от тумори в голи мишки, демонстрират инхибиране на растежа в присъствието на човешки интерферони, което подчертава потенциалното им приложение в изследвания, проучващи ефикасността на терапиите на базата на интерферон за рак на бъбреците.

Клетъчната линия ACHN е ценен инструмент за изследвания в областта на рака, особено в контекста на бъбречния аденокарцином. Тя служи като важен модел за изучаване на туморогенността, метастатичното поведение и ефектите на интерфероните върху пролиферацията на раковите клетки. Нейната способност да образува тумори in vivo и да реагира на лечение с интерферон предоставя солидна платформа за разработване и тестване на нови терапевтични подходи, насочени към карцинома на бъбречните клетки.

Тъкан
Бъбреци
Заболяване
Аденокарцином

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Туморогенен
Да, при голи мишки
Време за удвояване
30 часа

04Идентификатори

Източник
ACHN (каталожен номер на Cytion 300117)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1067

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
CAIx- (карбоанхидраза Ix)
Експресия на протеини
P53 положителен
Изоензими
CAIx-

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 x 104 клетки/cm2 ще доведе до конфлуентен монослой в рамките на 4 дни.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
22 години
Етническа принадлежност
Кавказки