Gå til innholdet
ACHN-celler
Vev
Nyre
Sykdom
Adenokarsinom

Dokumenter

ACHN-celler

Cell line · Produktnummer 300117

ACHN-cellelinjen stammer fra en ondartet pleural effusjon hos en 22 år gammel kaukasisk mann med vidt spredt metastatisk nyreadenokarsinom. Cellelinjen...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

ACHN-cellelinjen stammer fra ondartet pleural effusjon hos en 22 år gammel kaukasisk mann med vidt metastasert nyreadenokarsinom. Cellelinjen ble etablert i november 1979, etter direkte såing av kreftcellene i kulturflasker som inneholdt Eagle's MEM med 10 % FBS. Over en periode på 150 dager ble cellene opprettholdt og passert in vitro. Deretter ble cellene inokulert subkutant i nakne mus, hvor de dannet palpable, lokalt invasive svulster innen fire uker. Denne cellelinjen er tumorigen, som vist ved dens evne til å indusere svulster i 100 % av nakne mus (5/5) inokulert med 107 celler, med svulster som utviklet seg innen 21 dager.

ACHN-celler er preget av et vedheftende vekstmønster og uttrykker spesifikke isoenzymer, inkludert G6PD (type B). Denne cellelinjen er også kjent for sin respons på humane interferoner og interferoninducere, noe som gjør den spesielt nyttig for antiproliferative studier. Både de originale ACHN-cellene og de som er gjenvunnet fra svulster i nakne mus, viser veksthemming i nærvær av humane interferoner, noe som understreker deres potensielle anvendelse i studier som undersøker effekten av interferonbaserte terapier for nyrekreft.

ACHN-cellelinjen er et verdifullt verktøy for kreftforskning, spesielt i sammenheng med nyreadenokarsinom. Den fungerer som en viktig modell for å studere tumorigenisitet, metastatisk atferd og effekten av interferoner på kreftcelleproliferasjon. Dens evne til å danne svulster in vivo og reagere på interferonbehandling gir en robust plattform for utvikling og testing av nye terapeutiske tilnærminger rettet mot nyrecellekarsinom.

Vev
Nyre
Sykdom
Adenokarsinom

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus
Fordoblingstid
30 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
ACHN (Cytion-katalognummer 300117)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1067

05Uttrykk og mottakelighet

Reseptorer som uttrykkes
CAIx- (karbonanhydrase Ix)
Proteinekspresjon
P53-positiv
Isoenzymer
CAIx-

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2 vil resultere i et sammenflytende monolag innen 4 dager.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
22 år
Etnisitet
Kaukasisk