Pereiti prie turinio
ACHN ląstelės
Audinys
Inkstai
Liga
Adenokarcinoma

Dokumentai

ACHN ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300117

ACHN ląstelių linija buvo gauta iš 22 metų amžiaus kaukaziečio vyro, sergančio plačiai metastazavusiu inkstų adenokarcinoma, piktybinio pleuros išsiliejimo. Ląstelių linija...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

ACHN ląstelių linija yra kilusi iš 22 metų baltaodžio vyro, sergančio plačiai metastazavusiu inkstų adenokarcinoma, piktybinio pleuros išsiliejimo. Ląstelių linija buvo sukurta 1979 m. lapkričio mėn., tiesiogiai pasėję vėžines ląsteles į kultūros kolbas, kuriose buvo Eagle's MEM su 10 % FBS. Per 150 dienų ląstelės buvo išlaikytos ir perkeliamos in vitro. Vėliau ląstelės buvo įskiepytos po oda nuogoms pelėms, kur per keturias savaites jos suformavo apčiuopiamus, lokaliai invazinius navikus. Ši ląstelių linija yra tumorigeninė, kaip rodo jos gebėjimas sukelti navikus 100 % nuogų pelių (5/5), kurioms buvo įskiepytos 107 ląstelės, navikai išsivystė per 21 dieną.

ACHN ląstelės pasižymi adhezyviniu augimo modeliu ir ekspresuoja specifinius izofermentus, įskaitant G6PD (B tipo). Ši ląstelių linija taip pat žinoma dėl savo reakcijos į žmogaus interferonus ir interferono induktorius, todėl ji ypač naudinga antiproliferaciniams tyrimams. Tiek originalios ACHN ląstelės, tiek iš nuogų pelių navikų išgautos ląstelės rodo augimo slopinimą žmogaus interferonų akivaizdoje, o tai pabrėžia jų potencialų pritaikymą tyrimuose, kuriuose tiriamas interferono pagrindu sukurtų terapijų veiksmingumas inkstų vėžiui gydyti.

ACHN ląstelių linija yra vertinga priemonė vėžio tyrimams, ypač inkstų adenokarcinomos kontekste. Ji yra svarbus modelis navikų susidarymo, metastazavimo ir interferonų poveikio vėžio ląstelių proliferacijai tyrimams. Jos gebėjimas formuoti navikus in vivo ir reaguoti į interferono gydymą suteikia tvirtą pagrindą naujų terapinių metodų, skirtų inkstų ląstelių karcinomai, kūrimui ir bandymui.

Audinys
Inkstai
Liga
Adenokarcinoma

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Tumorogeninis
Taip, su nuogomis pelėmis
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
30 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
ACHN (Cytion katalogo numeris 300117)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1067

05Išraiška ir jautrumas

Išreikšti receptoriai
CAIx- (karboninė anhidrazė Ix)
Baltojų baltymų ekspresija
P53 teigiamas
Izofermentai
CAIx-

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2 per 4 dienas suformuos konfluentinį monosluoksnį.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
22 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių