Skip to content
เซลล์ ACHN
Tissue
ไต
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา

Documents

เซลล์ ACHN

Cell line · Product number 300117

The ACHN cell line is derived from the malignant pleural effusion of a 22-year-old Caucasian male with widely metastatic renal adenocarcinoma. The cell li...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ ACHN ได้มาจากน้ำในช่องเยื่อหุ้มปอดที่ผิดปกติของผู้ชายชาวคอเคเซียนอายุ 22 ปี ซึ่งมีมะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิด adenocarcinoma ที่แพร่กระจายอย่างกว้างขวาง เซลล์ไลน์นี้ถูกสร้างขึ้นในเดือนพฤศจิกายนปี 1979 โดยทำการเพาะเซลล์มะเร็งโดยตรงลงในขวดเพาะเลี้ยงที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์ชนิด Eagle's MEM ที่มี FBS 10% ตลอดระยะเวลา 150 วัน เซลล์ถูกเก็บรักษาและเพาะเลี้ยงในหลอดทดลอง หลังจากนั้น เซลล์ถูกฉีดเข้าไปใต้ผิวหนังของหนูเมาส์ที่ไม่มีขน ซึ่งเซลล์เหล่านี้ก่อตัวเป็นก้อนเนื้องอกที่สามารถสัมผัสได้และมีการรุกรานเฉพาะที่ภายในสี่สัปดาห์ สายพันธุ์เซลล์นี้สามารถก่อให้เกิดเนื้องอกได้ ดังที่เห็นได้จากความสามารถในการก่อให้เกิดเนื้องอกในหนูเมาส์ที่ไม่มีขน 100% (5/5 ตัว) ที่ได้รับเซลล์ 107 เซลล์ โดยเนื้องอกพัฒนาภายใน 21 วัน

เซลล์ ACHN มีลักษณะการเจริญเติบโตแบบเกาะติดและแสดงไอโซเอนไซม์เฉพาะ รวมถึง G6PD (ชนิด B) เซลล์ไลน์นี้ยังเป็นที่รู้จักจากการตอบสนองต่ออินเตอร์เฟอรอนของมนุษย์และสารกระตุ้นอินเตอร์เฟอรอน ทำให้มีประโยชน์อย่างยิ่งในการศึกษาการยับยั้งการเพิ่มจำนวนของเซลล์ ทั้งเซลล์ ACHN ดั้งเดิมและเซลล์ที่แยกได้จากเนื้องอกในหนูเมาส์ที่ไม่มีระบบภูมิคุ้มกัน (nude mice) แสดงการยับยั้งการเจริญเติบโตเมื่อมีอินเตอร์เฟอรอนของมนุษย์อยู่ ซึ่งเน้นย้ำถึงศักยภาพในการนำไปใช้ศึกษาประสิทธิภาพของการรักษาด้วยอินเตอร์เฟอรอนสำหรับมะเร็งไต

เซลล์ไลน์ ACHN เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าสำหรับการวิจัยโรคมะเร็ง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในบริบทของมะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิด adenocarcinoma ของไต มันทำหน้าที่เป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการศึกษาความสามารถในการก่อตัวของเนื้องอก (tumorigenicity) พฤติกรรมการแพร่กระจาย (metastatic behavior) และผลกระทบของ interferons ต่อการเจริญเติบโตของเซลล์มะเร็ง ความสามารถของมันในการก่อตัวของเนื้องอกในร่างกาย (in vivo) และการตอบสนองต่อการรักษาด้วย interferon ให้แพลตฟอร์มที่แข็งแกร่งสำหรับการพัฒนาและทดสอบแนวทางการรักษาใหม่ ๆ ที่มุ่งเป้าไปที่มะเร็งต่อมน้ำเหลืองชนิด carcinoma ของไต

Tissue
ไต
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน
Doubling time
30 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
เอชซีเอ็น (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300117)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1067

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
CAIx- (คาร์บอนิกแอนไฮเดรส ไอเอกซ์)
Protein expression
P53 เป็นบวก
Isoenzymes
CAIx-

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 104 เซลล์/cm2 จะทำให้เกิดชั้นเดียวที่หนาแน่นภายใน 4 วัน
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
22 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน