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HEK293-CXCR4
Tissue
Rim fetal
Disease
Transformadas/imortalizadas; não tumorigênicas (linha celular HEK293)

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HEK293-CXCR4

Cell line · Product number 305420

Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entitites the pr...

US$2,200.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

Aviso legal: Os preços exibidos para as linhagens celulares destinam-se exclusivamente a clientes acadêmicos ou sem fins lucrativos. Para entidades comerciais, o preço é de aproximadamente €6.250.
Se você representa uma entidade comercial ou não tem certeza de qual categoria se aplica, por favor, entre em contato conosco.


A linha celular HEK293-CXCR4 é uma linha celular HEK293 recombinante estável, projetada para expressar o receptor CXCR4 em um nível médio-alto, de aproximadamente 7.800 moléculas por célula. Essa linha celular foi desenvolvida utilizando a tecnologia “landing pad” da inscreenex, que garante a integração precisa e reproduzível do gene CXCR4 em um locus genômico específico e pré-validado. O CXCR4, também conhecido como CD184, é um receptor de quimiocinas pertencente à família dos receptores acoplados à proteína G (GPCR). Ele desempenha um papel crucial no tráfego de células imunes e na hematopoiese, além de atuar como co-receptor para a entrada do HIV nas células. O CXCR4 também está implicado no crescimento tumoral, na metástase e na angiogênese, particularmente em neoplasias hematológicas, o que o torna um alvo significativo na pesquisa sobre o câncer e no desenvolvimento de terapias.

A expressão do CXCR4 nessa linhagem celular foi confirmada por meio de citometria de fluxo com um anticorpo específico para o alvo, garantindo uma densidade de receptores consistente e confiável em toda a população celular.

Tissue
Rim fetal
Disease
Transformadas/imortalizadas; não tumorigênicas (linha celular HEK293)
Applications
Desenvolvimento de anticorpos direcionados ao CXCR4; farmacologia dos GPCRs; estudos sobre a sinalização do SDF-1/CXCL12; pesquisa sobre co-receptores do HIV; triagem de medicamentos antitumorais e antimetastáticos

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This engineered HEK293 line contains a CXCR4 expression cassette for GPCR signaling and ligand-binding analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Cell type
Células epiteliais
Doubling time
aprox. 24-36 horas

04Identifiers

Citation
HEK293-CXCR4 (número de catálogo da Cytion 305420)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_6G21

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
CXCR4 (CD184)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione ao meio 10% de FBS, 1 mM de piruvato de sódio, 10 mM de HEPES e 1% de NEAA. Adicione Geneticin (G418-Sulfat) para atingir uma concentração final de 1 mg/mL.
Dissociation reagent
Tripsina-EDTA
Subculturing
Para cultura de células aderentes de rotina: Aspire o meio de cultura antigo das células aderentes e lave-as com PBS para remover qualquer resíduo de meio. Após aspirar o PBS, adicione o volume apropriado de solução de tripsina/EDTA com base no tamanho do recipiente de cultura (por exemplo, 1 ml para um frasco T25, 3 ml para um frasco T75) e incube à temperatura ambiente ou a 37 °C até que as células se desprendam (5 a 10 minutos). Monitore o desprendimento ao microscópio e bata suavemente no recipiente, se necessário, para liberar as células. Uma vez desprendidas, adicione meio completo para inativar a tripsina/EDTA, ressuspenda delicadamente as células e transfira uma alíquota da suspensão celular para um novo recipiente de cultura contendo meio fresco. Coloque o recipiente em uma incubadora ajustada para 37 °C com 5% de CO₂ e troque o meio a cada 2 a 3 dias.
Split ratio
1 a 5
Seeding density
2 a 4 x 10⁴ células/cm²
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Post-thaw recovery

Após o descongelamento, divida as células na proporção de 1:2 a 1:3 em frascos T25 e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas.

Para obter melhor aderência e viabilidade após o descongelamento das células, recomendamos o uso de frascos ou placas revestidos com colágeno para a semeadura inicial após a recuperação criogênica. O revestimento com colágeno não é necessário para a cultura de rotina subsequente das células.

Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
Feto