CHO-EPCAM
Cell line · Product number 305974
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01General information
- Description
免责声明：所显示的细胞系价格仅适用于学术/非营利客户。对于商业机构，价格约为 6,250 欧元。
如果您代表商业机构，或不确定应归入哪一类，请 联系我们。
CHO-EPCAM细胞是经过基因工程改造的重组中国仓鼠卵巢（CHO）细胞，可稳定表达人上皮细胞粘附分子（EpCAM；CD326/TACSTD1）。EpCAM是一种跨膜糖蛋白，广泛表达于上皮组织，并在许多源自上皮细胞的癌症中高度上调。EpCAM参与细胞间粘附、增殖、分化以及与肿瘤进展和转移相关的信号传导通路。 通常构建稳定的CHO-EPCAM模型，以提供可控且可重复的EpCAM表面表达，用于涉及治疗性抗体和工程化免疫细胞疗法的结合、靶向及功能检测。
CHO-EPCAM细胞在肿瘤学和转化医学研究中被广泛应用，用于开发和表征抗EpCAM单克隆抗体、抗体药物偶联物、双特异性T细胞结合剂，以及CAR-T或CAR-NK细胞疗法。 该模型特别适用于评估抗原特异性结合亲和力、受体占用率、内化动力学、细胞毒性及免疫突触的形成。此外，这些细胞还可支持流式细胞术检测的开发、高通量筛选，以及 EpCAM 靶向成像剂或诊断平台的验证。由于 CHO 细胞具有稳定的生长特性且多种人类上皮标志物的内源性表达极低，因此为重组抗原表达研究提供了稳定的背景。
- Tissue
- 卵巢
- Disease
- 中国仓鼠卵巢细胞，非肿瘤性；经基因工程改造，可表达EpCAM（CD326）表面抗原
- Applications
- 抗体筛选；EpCAM靶向治疗研发；ADCC/CDC检测；上皮性肿瘤研究；流式细胞术
02Classification
- Organism
- Chinese hamster
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent and suspension
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This CHO cell line contains an EpCAM expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮样
- Cell type
- 卵巢上皮细胞
- Doubling time
- 约14-16小时
04Identifiers
- Citation
- CHO-EPCAM（Cytion 货号 305974）
- NCBI TaxID
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_D2TL
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- EpCAM（CD326）
06Handling and culture
- Culture medium
用于粘附培养：DMEM:Ham's F12 (1:1)，w: 3.1 g/L 葡萄糖，w: 2.5 mM L-谷氨酰胺，w: 15 mM HEPES，w: 0.5 mM 丙酮酸钠，w: 1.2 g/L NaHCO3（Cytion 商品编号 820400a）。
用于悬浮培养：CHO 生长培养基 A（来自 InSCREENeX；InSCREENeX 目录编号 INS-ME-1039）
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 用于粘附培养：在培养基中添加 5% FBS。加入基因素（G418-硫酸酯），使最终浓度达到 0.5 mg/mL。
- Dissociation reagent
- 用于粘附培养：胰蛋白酶-EDTA
- Subculturing
- 用于常规粘附细胞培养：吸出粘附细胞中的旧培养基，并用 PBS 冲洗以去除残留的培养基。吸出 PBS 后，根据培养皿大小加入适量的胰蛋白酶/EDTA 溶液（如 T25 烧瓶 1 毫升，T75 烧瓶 3 毫升），室温或 37°C 孵育 5-10 分钟，直至细胞分离。在显微镜下观察细胞分离情况，必要时轻轻拍打容器以释放细胞。细胞分离后，加入完全培养基以灭活胰蛋白酶/EDTA，轻轻重悬细胞，然后将等分的细胞悬浮液转移到装有新鲜培养基的新培养皿中。将培养皿放入温度为 37°C、二氧化碳浓度为 5%的培养箱中，每 2-3 天更换一次培养基。
- Split ratio
- 1 到 5
- Seeding density
- 2至5×10⁴个细胞/平方厘米
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Post-thaw recovery
解冻后，按 1:2 至 1:3 的比例将细胞分装在 T25 烧瓶中，让细胞从冷冻过程中恢复并粘附（对于粘附培养物）至少 24 小时。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 成人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时，必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时，必须穿戴适当的防护手套和防护服，并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险，因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes