
- Tecido
- Ovário
- Doença
- Ovário de hamster chinês, não neoplásico; geneticamente modificado para a expressão de EpCAM (CD326) na superfície
Documentos
CHO-EPCAM
Cell line · Número do produto 305974
Aviso legal: Os preços apresentados para as linhas celulares destinam-se exclusivamente a clientes do setor académico ou sem fins lucrativos. Para entidades comerciais, o preço...
Personalização / Recomendações
- CHO-EPCAMCell line€1,900.00
01Informações gerais
- Descrição
Aviso legal: Os preços apresentados para as linhas celulares destinam-se exclusivamente a clientes do setor académico ou sem fins lucrativos. Para entidades comerciais, o preço é de aproximadamente 6 250 €.
Se representar uma entidade comercial ou não tiver a certeza de qual a categoria a que se enquadra, por favor contacte-nos.
As células CHO-EPCAM são células recombinantes de ovário de hamster chinês (CHO) modificadas para expressar de forma estável a molécula de adesão celular epitelial humana (EpCAM; CD326/TACSTD1), uma glicoproteína transmembranar amplamente expressa em tecidos epiteliais e altamente regulada positivamente em muitos cancros de origem epitelial. A EpCAM está envolvida na adesão célula-célula, proliferação, diferenciação e vias de sinalização associadas à progressão tumoral e metástase. Modelos CHO-EPCAM estáveis são comumente gerados para fornecer expressão superficial controlada e reproduzível de EpCAM para uso em ensaios de ligação, direcionamento e funcionais envolvendo anticorpos terapêuticos e terapias com células imunes modificadas.
As células CHO-EPCAM são amplamente utilizadas em oncologia e na investigação translacional para o desenvolvimento e caracterização de anticorpos monoclonais anti-EpCAM, conjugados anticorpo-fármaco, ativadores bispecíficos de células T e terapias com células CAR-T ou CAR-NK. O modelo é particularmente útil para avaliar a afinidade de ligação específica do antígeno, a ocupação do recetor, a cinética de internalização, a citotoxicidade e a formação de sinapses imunitárias. Além disso, estas células permitem o desenvolvimento de ensaios de citometria de fluxo, o rastreio de alto rendimento e a validação de agentes de imagem ou plataformas de diagnóstico direcionados para o EpCAM. Como as células CHO apresentam características de crescimento estáveis e uma expressão endógena mínima de muitos marcadores epiteliais humanos, proporcionam um contexto consistente para estudos de expressão de antígenos recombinantes.
- Tecido
- Ovário
- Doença
- Ovário de hamster chinês, não neoplásico; geneticamente modificado para a expressão de EpCAM (CD326) na superfície
- Aplicações
- Rastreio de anticorpos; desenvolvimento de terapias direcionadas para a EpCAM; ensaios ADCC/CDC; investigação sobre tumores epiteliais; citometria de fluxo
02Classificação
- Organismo
- Hamster chinês
- Sexo
- Feminino
- Propriedades de crescimento
- Adesão e suspensão
- Estatuto em matéria de OGM
- GMO-S1
- Detalhes sobre o estatuto dos OGM
- GMO-S1: This CHO cell line contains an EpCAM expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- De tipo epitelial
- Tipo de célula
- Célula epitelial do ovário
- Tempo de duplicação
- aprox. 14-16 horas
04Identificadores
- Referência
- CHO-EPCAM (número de catálogo da Cytion 305974)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_D2TL
05Expressão e suscetibilidade
- Receptores expressos
- EpCAM (CD326)
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
Para culturas aderentes: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glucose, w: 2.5 mM L-Glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Piruvato de sódio, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion artigo número 820400a)
Para culturas em suspensão: CHO Growth Medium A (da InSCREENeX; número de catálogo da InSCREENeX INS-ME-1039)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Para culturas aderentes: Suplementar o meio com 5% de FBS. Adicionar Geneticin (G418-Sulfat) para obter uma concentração final de 0,5 mg/mL.
- Reagente de dissociação
- Para culturas aderentes: Tripsina-EDTA
- Subcultura
- Para cultura de rotina de células aderentes: Aspirar o meio de cultura antigo das células aderentes e lavá-las com PBS para remover qualquer meio restante. Depois de aspirar o PBS, adicionar o volume adequado de solução de tripsina/EDTA com base no tamanho do recipiente de cultura (por exemplo, 1 ml para um frasco T25, 3 ml para um frasco T75) e incubar à temperatura ambiente ou a 37°C durante 5-10 minutos, ou até as células se destacarem. Monitorizar o desprendimento sob um microscópio e, se necessário, bater suavemente no recipiente para libertar as células. Uma vez desprendidas, adicionar meio completo para inativar a tripsina/EDTA, ressuspender suavemente as células e transferir uma alíquota da suspensão de células para um novo recipiente de cultura contendo meio fresco. Colocar o recipiente numa incubadora regulada para 37°C com 5%de CO2 e mudar o meio a cada 2-3 dias.
- Rácio de divisão
- 1 a 5
- Densidade de sementeira
- 2 a 5 x 104 células/cm2
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Recuperação após o descongelamento
Após a descongelação, dividir as células numa proporção de 1:2 a 1:3 em frascos T25 e deixar as células recuperar do processo de congelação e aderir (para culturas aderentes) durante pelo menos 24 horas.
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Idade do dador
- Adulto
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim