Mine otse sisu juurde
CHO-EPCAM
Kude
Munasarjad
Haigus
Hiina hamstri munasarja rakud, mitte-neoplastilised; geneetiliselt muundatud EpCAM (CD326) pinnalise ekspressiooni saavutamiseks

Dokumendid

CHO-EPCAM

Cell line · Toote number 305974

Vastutusest loobumine: Rakuliinide juures näidatud hinnad kehtivad ainult akadeemilistele ja mittetulunduslikele klientidele. Äriühingute puhul on hinnad...

€1,900.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Tellimusel valmistatud
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Vastutuse välistamine: Rakuliinide juures näidatud hinnad kehtivad ainult akadeemilistele ja mittetulunduslikele klientidele. Äriühingute puhul on hind ligikaudu 6250 eurot.
Kui esindate äriühingut või ei ole kindel, milline kategooria teie puhul kehtib, palun võtke meiega ühendust.


CHO-EPCAM-rakud on rekombinantseid hiina hamstri munasarja (CHO) rakke, mis on konstrueeritud stabiilselt ekspresseerima inimese epiteelirakkude adhesiivmolekuli (EpCAM; CD326/TACSTD1) – transmembraanset glükoproteiini, mida ekspresseeritakse laialdaselt epiteelikudedes ja mille ekspressioon on paljudes epiteelist pärinevates vähivormides tugevalt ülesreguleeritud. EpCAM osaleb rakkudevahelises adhesiivis, proliferatsioonis, diferentseerumises ning signaaliteedes, mis on seotud tuumori progresseerumise ja metastaasidega. Stabiilseid CHO-EPCAM-mudeleid luuakse tavaliselt selleks, et tagada kontrollitud ja reprodutseeritav EpCAM-i pinnal ekspressioon, mida kasutatakse seondumise, sihtmärgistamise ja funktsionaalsete analüüside läbiviimisel, mis hõlmavad terapeutilisi antikehi ja geneetiliselt muundatud immuunrakkude ravi.

CHO-EPCAM-rakke kasutatakse laialdaselt onkoloogias ja translatsioonilises uurimistöös anti-EpCAM-monoklonaalsete antikehade, antikeha-ravimkonjugaatide, bispetsiifiliste T-rakkude aktivaatorite ning CAR-T- või CAR-NK-rakkude ravimeetodite arendamiseks ja iseloomustamiseks. Mudel on eriti kasulik antigeenispetsiifilise seondumisafiinsuse, retseptori hõivatuse, internaliseerumise kineetika, tsütotoksilisuse ja immuunsünapsi moodustumise hindamiseks. Lisaks toetavad need rakud voolutsütomeetria analüüside arendamist, suure läbilaskevõimega sõelumist ning EpCAM-ile suunatud pildistamisainete või diagnostiliste platvormide valideerimist. Kuna CHO-rakud näitavad stabiilseid kasvutunnuseid ja paljude inimese epiteelmarkerite minimaalse endogeense ekspressiooni, pakuvad nad ühtlast tausta rekombinantse antigeeni ekspressiooni uuringuteks.

Kude
Munasarjad
Haigus
Hiina hamstri munasarja rakud, mitte-neoplastilised; geneetiliselt muundatud EpCAM (CD326) pinnalise ekspressiooni saavutamiseks
Rakendused
Antikehade sõelumine; EpCAM-ile suunatud ravi väljatöötamine; ADCC/CDC-analüüsid; epiteelkasvajate uurimine; voolutsütomeetria

02Klassifikatsioon

Organism
Hiina hamster
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Adhesiivne ja suspensioon
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This CHO cell line contains an EpCAM expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Munasarja epiteelirakk
Kahekordistumisaeg
u. 14–16 tundi

04Tunnused

Viide
CHO-EPCAM (Cytioni katalooginumber 305974)
NCBI maksukood
10029
Cellosaurus
CVCL_D2TL

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
EpCAM (CD326)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond

Kinniste kultuuride puhul: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikli number 820400a)

Suspensioonikultuuride puhul: CHO kasvukeskkond A (InSCREENeX; InSCREENeXi katalooginumber INS-ME-1039)

Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Kinniste kultuuride puhul: Täiendage keskkonda 5% FBS-ga. Lisage genetitsiini (G418-Sulfat), et saavutada lõplik kontsentratsioon 0,5 mg/ml.
Dissotsiatsioonireaktiiv
Kinniste kultuuride puhul: Trypsin-EDTA
Kultuuri edasikasvatamine
Rutiinseks adherentseks rakukultuuriks: Aspireerige adhereeruvatelt rakkudelt vana kultuurkeskkond ja peske neid PBS-ga, et eemaldada allesjäänud keskkond. Pärast PBS-i aspiratsiooni lisage sobiv kogus trüpsiini/EDTA lahust vastavalt kasvatusanuma suurusele (nt 1 ml T25 kolvi puhul, 3 ml T75 kolvi puhul) ja inkubeerige toatemperatuuril või 37°C 5-10 minutit või kuni rakud eralduvad. Jälgige rakkude eraldumist mikroskoobi all ja koputage vajadusel õrnalt anumat, et rakud eralduksid. Kui rakud on eraldunud, lisage trüpsiini/EDTA inaktiveerimiseks täielikku söötmeainet, suspenseerige rakud ettevaatlikult uuesti ja kandke rakususpensiooni alikvoot uude, värsket söötmeainet sisaldavasse kultuuranumasse. Asetage anum inkubaatorisse, mille temperatuur on 37 °C ja 5%CO2, ning vahetage söötme iga 2-3 päeva tagant.
Jagamissuhe
1–5
Külvitihedus
2 kuni 5 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist

Pärast sulatamist jagage rakud 1:2 kuni 1:3 T25 kolvidesse ja laske rakkudel taastuda külmumisprotsessist ja adhereeruda (adhereeruvate kultuuride puhul) vähemalt 24 tundi.

Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Täiskasvanud