Přejít na obsah
CHO-EPCAM
Tkáň
Ovarium
Nemoc
Vaječníky čínského křečka, nenádorové; geneticky modifikované pro expresi EpCAM (CD326) na povrchu buněk

Dokumenty

CHO-EPCAM

Cell line · Číslo výrobku 305974

Upozornění: Ceny uvedené u buněčných linií platí výhradně pro akademické a neziskové zákazníky. Pro komerční subjekty platí ceny...

€1,900.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Na zakázku
1

01Obecné informace

Popis

Upozornění: Ceny buněčných linií uvedené na této stránce platí výhradně pro akademické a neziskové zákazníky. Pro komerční subjekty činí cena přibližně 6 250 EUR.
Pokud zastupujete komerční subjekt nebo si nejste jisti, do které kategorie spadáte, prosím nás kontaktujte.


CHO-EPCAM buňky jsou rekombinantní buňky vaječníků čínského křečka (CHO), které byly geneticky upraveny tak, aby stabilně exprimovaly lidskou adhezivní molekulu epiteliálních buněk (EpCAM; CD326/TACSTD1), transmembránový glykoprotein široce exprimovaný v epiteliálních tkáních a vysoce upregulovaný v mnoha nádorech epiteliálního původu. EpCAM se podílí na adhezi mezi buňkami, proliferaci, diferenciaci a signálních drahách spojených s progresí nádoru a metastázováním. Stabilní modely CHO-EPCAM se běžně vytvářejí za účelem zajištění kontrolované a reprodukovatelné povrchové exprese EpCAM pro použití v testech vazby, cílení a funkčních testech zahrnujících terapeutické protilátky a terapie pomocí modifikovaných imunitních buněk.

Buňky CHO-EPCAM jsou široce používány v onkologii a translačním výzkumu pro vývoj a charakterizaci monoklonálních protilátek proti EpCAM, konjugátů protilátek a léčiv, bispecifických aktivátorů T-buněk a terapií CAR-T nebo CAR-NK buňkami. Tento model je obzvláště užitečný pro hodnocení antigen-specifické vazebné afinity, obsazení receptoru, kinetiky internalizace, cytotoxicity a tvorby imunitních synapsí. Kromě toho tyto buňky podporují vývoj testů pomocí průtokové cytometrie, screening s vysokou propustností a validaci zobrazovacích činidel nebo diagnostických platforem zaměřených na EpCAM. Vzhledem k tomu, že buňky CHO vykazují stabilní růstové charakteristiky a minimální endogenní expresi mnoha lidských epiteliálních markerů, poskytují konzistentní pozadí pro studie exprese rekombinantních antigenů.

Tkáň
Ovarium
Nemoc
Vaječníky čínského křečka, nenádorové; geneticky modifikované pro expresi EpCAM (CD326) na povrchu buněk
Aplikace
Screening protilátek; vývoj terapie zaměřené na EpCAM; testy ADCC/CDC; výzkum epiteliálních nádorů; průtoková cytometrie

02Klasifikace

Organismus
čínský křeček
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Adhezivní a suspenzní
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This CHO cell line contains an EpCAM expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Epitelová buňka vaječníku
Doba zdvojnásobení
cca 14–16 hodin

04Identifikátory

Citace
CHO-EPCAM (katalogové číslo Cytion 305974)
Daňové identifikační číslo NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_D2TL

05Exprese a náchylnost

Exprimované receptory
EpCAM (CD326)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium

Pro adherentní kultury: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)

Pro suspenzní kultury: Růstové médium CHO A (od společnosti InSCREENeX; katalogové číslo společnosti InSCREENeX INS-ME-1039)

Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Pro adherentní kultury: Doplňte médium o 5% FBS. Přidejte geneticin (G418-Sulfat), abyste dosáhli konečné koncentrace 0,5 mg/ml.
Disociační činidlo
Pro adherentní kultury: Trypsin-EDTA
Subkultivace
Pro běžné kultivace adherentních buněk: Z adherentních buněk odsaďte staré kultivační médium a promyjte je PBS, abyste odstranili veškeré zbývající médium. Po odsátí PBS přidejte příslušný objem roztoku Trypsin/EDTA podle velikosti kultivační nádoby (např. 1 ml pro baňku T25, 3 ml pro baňku T75) a inkubujte při pokojové teplotě nebo 37 °C po dobu 5 až 10 minut nebo dokud se buňky neoddělí. Oddělování sledujte pod mikroskopem a v případě potřeby jemně poklepejte na nádobu, aby se buňky uvolnily. Po oddělení přidejte kompletní médium k inaktivaci trypsinu/EDTA, jemně resuspendujte buňky a alikvotní část buněčné suspenze přeneste do nové kultivační nádoby obsahující čerstvé médium. Umístěte nádobu do inkubátoru nastaveného na 37 °C s 5 %CO2 a každé 2 až 3 dny vyměňte médium.
Poměr rozdělení
1 až 5
Hustota výsevu
2 až 5 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení

Po rozmrazení rozdělte buňky v poměru 1:2 až 1:3 do baněk T25 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazování a adherovat (v případě adherujících kultur).

Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Dospělí