
- Audums
- Olnīcas
- Slimība
- Ķīniešu kāmja olnīca, bez audzēja; ģenētiski modificēta EpCAM (CD326) virsmas ekspresijai
Dokumenti
CHO-EPCAM
Cell line · Preces numurs 305974
Atbrīvojums no atbildības: Šeit norādītās šūnu līniju cenas attiecas vienīgi uz akadēmiskajiem/bezpeļņas klientiem. Komerciālajām organizācijām cenas...
Pielāgošana / Ieteikumi
- CHO-EPCAMCell line€1,900.00
01Vispārīga informācija
- Apraksts
Atbrīvojums no atbildības: Šeit norādītās šūnu līniju cenas attiecas tikai uz akadēmiskajiem/bezpeļņas klientiem. Komerciālām organizācijām cena ir aptuveni 6250 eiro.
Ja Jūs pārstāvat komerciālu organizāciju vai neesat pārliecināts, kura kategorija Jums attiecas, lūdzu, sazinieties ar mums.
CHO-EPCAM šūnas ir rekombinantas Ķīnas kāmja olnīcu (CHO) šūnas, kas inženierijas ceļā modificētas, lai stabili ekspresētu cilvēka epitēlija šūnu adhezijas molekulu (EpCAM; CD326/TACSTD1) — transmembrānu glikoproteīnu, kas plaši ekspresējas epitēlija audos un ir ievērojami paaugstināts daudzos no epitēlija atvasinātos vēža veidos. EpCAM ir iesaistīts šūnu savstarpējā adhezijā, proliferācijā, diferenciācijā un signālceļos, kas saistīti ar audzēja progresēšanu un metastāzēm. Stabilus CHO-EPCAM modeļus parasti izveido, lai nodrošinātu kontrolētu un reproducējamu EpCAM virsmas ekspresiju izmantošanai saistīšanās, mērķēšanas un funkcionālajos testos, kuros iesaistītas terapeitiskās antivielas un inženierijas imūno šūnu terapijas.
CHO-EPCAM šūnas plaši izmanto onkoloģijā un translacionālajos pētījumos, lai izstrādātu un raksturotu anti-EpCAM monoklonālās antivielas, antivielu-zāļu konjugātus, bispecifiskos T šūnu aktivatorus un CAR-T vai CAR-NK šūnu terapijas. Modelis ir īpaši noderīgs, lai novērtētu antigēna specifisko saistīšanās afinitāti, receptoru aizņemšanu, internalizācijas kinētiku, citotoksicitāti un imūno sinapšu veidošanos. Turklāt šīs šūnas atbalsta plūsmas citometrijas testu izstrādi, augstas caurlaidspējas skrīningu un EpCAM mērķa attēlveidošanas līdzekļu vai diagnostisko platformu validāciju. Tā kā CHO šūnas uzrāda stabilas augšanas īpašības un minimālu daudzu cilvēka epitēlija marķieru endogēno ekspresiju, tās nodrošina konsekventu fonu rekombinantā antigēna ekspresijas pētījumiem.
- Audums
- Olnīcas
- Slimība
- Ķīniešu kāmja olnīca, bez audzēja; ģenētiski modificēta EpCAM (CD326) virsmas ekspresijai
- Pieteikumi
- Antivielu skrīnings; EpCAM mērķtiecīgas terapijas izstrāde; ADCC/CDC analīzes; epitēlija audzēju pētījumi; plūsmas citometrija
02Klasifikācija
- Organisms
- Ķīniešu kāmītis
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Adhēzija un suspensija
- ĢMO statuss
- GMO-S1
- Sīkāka informācija par ĢMO statusu
- GMO-S1: This CHO cell line contains an EpCAM expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlijveidīgs
- Šūnu tips
- Olnīcas epitēlija šūna
- Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
- aptuveni 14–16 stundas
04Identifikatori
- Atsauce
- CHO-EPCAM (Cytion kataloga numurs 305974)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_D2TL
05Pazīmes un uzņēmība
- Ekspresētie receptori
- EpCAM (CD326)
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
Pielipušām kultūrām: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Suspensijas kultūrām: CHO augšanas barotne A (no InSCREENeX; InSCREENeX kataloga numurs INS-ME-1039)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Pielipušām kultūrām: Pievienojiet barotni ar 5% FBS. Pievienojiet ģenētiķīnu (G418-Sulfat), lai sasniegtu 0,5 mg/ml galīgo koncentrāciju.
- Disociācijas reaģents
- Pielipušām kultūrām: Tripsīns-EDTA
- Pārstādīšana
- Parastai adherentu šūnu kultūrai: Lai noņemtu atlikušo barotni, aspirējiet veco barotni no pielipušajām šūnām un izskalojiet tās ar PBS, lai noņemtu atlikušo barotni. Pēc PBS atsūknēšanas pievienojiet atbilstošu tripsīna/EDTA šķīduma tilpumu, ņemot vērā kultūras trauka lielumu (piemēram, 1 ml T25 kolbai, 3 ml T75 kolbai), un inkubējiet istabas temperatūrā vai 37 °C 5 līdz 10 minūtes, vai līdz šūnas atdalās. Novērot atdalīšanos ar mikroskopu un, ja nepieciešams, viegli piesitiet trauku, lai atbrīvotu šūnas. Pēc atdalīšanās pievienot pilnu barotni, lai inaktivētu tripsīnu/EDTA, uzmanīgi resuspendēt šūnas un šūnu suspensijas alikvotu pārvietot jaunā barotnē ar svaigu barotni. Ievietot trauku inkubatorā, kas iestatīts 37 °C temperatūrā ar 5 %CO2, un ik pēc 2-3 dienām mainīt barotni.
- Sadalījuma attiecība
- no 1 līdz 5
- Sēšanas blīvums
- 2 līdz 5 x 104 šūnas/cm2
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas sadaliet šūnas T25 kolbās proporcijā 1:2 līdz 1:3 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un salipt (adhēzijas kultūrām) vismaz 24 stundas.
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- Pieaugušo
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā