Клетки DLD-1
Cell line · Номер на продукта 300220
DLD-1 е клетъчна линия от човешки колоректален аденокарцином, получена от дисталната част на дебелото черво на възрастен пациент. Тези клетки имат епителиална морфология и са ...
Персонализиране / Препоръки
- Клетки DLD-1Cell line€430.00
Препоръчани (най-новата партида)
01Обща информация
- Описание
DLD-1 е човешка клетъчна линия на колоректален аденокарцином, получена от дисталното дебело черво на възрастен пациент. Тези клетки са епителни по морфология и първоначално са създадени за изследване на механизмите и патологията на колоректалния рак. Клетките DLD-1 се използват често в онкологичните изследвания, особено в проучвания, насочени към молекулярната биология на рака, генната експресия и ефектите на различни химиотерапевтични агенти.
Тази клетъчна линия е известна с хетерозиготната си мутация на KRAS в кодон 13, която е често срещана при колоректалния рак, като я замесва в оцеляването и пролиферацията на раковите клетки. Освен това DLD-1 показва мутации в гена APC, които допринасят за дерегулацията на сигналния път на Wnt, критичен елемент в колоректалната канцерогенеза. Широкото използване на DLD-1 в научните изследвания осигурява ценни познания за поведението на тумора, отговора на лекарствата и генетиката на рака, което го превръща в жизненоважен модел в изследванията на колоректалния рак и разработването на терапии.
- Тъкан
- Дебело черво
- Заболяване
- Аденокарцином
- Синоними
- DLD 1
- DLD1
- CoCL3
02Класификация
- Организъм
- Човек
- Секс
- Мъж
- Свойства, свързани с растежа
- Привърженик
- Ниво на биологична безопасност
- 1
03Характеристики
- Морфология
- Подобни на епител
- Туморогенен
- При голи мишки
- Кариотип
- 2n = 46
- Време за удвояване
- 15 часа
04Идентификатори
- Източник
- DLD-1 (каталожен номер 300220 на Cytion)
- Данъчен идентификационен номер в NCBI
- 9606
- Целозавър
- CVCL_0248
05Проява и предразположеност
- Експресия на протеини
- Кератин
- Вируси
- Отрицателна обратна транскриптаза
- Продукти
- Карциноембрионален антиген (CEA) 0,5 ng/10 експ6 клетки/10 дни, алкална фосфатаза
06Обработка и отглеждане
- Хранителна среда
- RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
- Атмосфера за инкубация
37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.
- Добавки
- Допълнете средата с 10% FBS
- Реагент за дисоциация
- Accutase
- Пресаждане
- Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
- Плътност на засяването
- 1 до 2 x 104 клетки/cm2
- Обновяване на течността
- 2 до 3 пъти седмично
- Размразяване и култивиране
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Контрол на качеството и криоконсервация
- Стерилност
Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.
За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.
- Среда за замразяване
- Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
- Условия за съхранение
За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.
- Условия за доставка
Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
08Дарител
- Възраст на донора
- 67 години
09Правни въпроси и безопасност
- Мерки за безопасност
- Когато планирате да съхранявате криопрепарат в течен азот за бъдещо размразяване, е задължително да спазвате строги мерки за безопасност. Подходящите защитни ръкавици и облекло са от съществено значение, а по време на прехвърлянето на замразени проби към или от резервоара с течен азот е необходимо да се използва маска за лице или предпазни очила. Това се прави, за да се намали рискът от нараняване от потенциални експлозии на криовиолите при изваждането им, които могат да доведат до изхвърляне на остри фрагменти.
- Гаранция
Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа
За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация
- Необходимо е споразумение за прехвърляне на материали
- Да
.jpg)