Pāriet uz saturu
DLD-1 šūnas
Audums
Resnās zarnas
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
DLD 1, DLD1, CoCL3

Dokumenti

DLD-1 šūnas

Cell line · Preces numurs 300220

DLD-1 ir cilvēka kolorektālās adenokarcinomas šūnu līnija, kas iegūta no pieauguša pacienta distālās resnās zarnas. Šīs šūnas morfoloģiski ir epitēlija šūnas un tās tika ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

DLD-1 ir cilvēka kolorektālās adenokarcinomas šūnu līnija, kas iegūta no pieauguša pacienta distālās resnās zarnas. Šīm šūnām ir epitēlija morfoloģija, un sākotnēji tās tika izveidotas, lai pētītu kolorektālā vēža mehānismus un patoloģiju. DLD-1 šūnas parasti izmanto onkoloģiskajos pētījumos, jo īpaši pētījumos, kas vērsti uz vēža molekulāro bioloģiju, gēnu ekspresiju un dažādu ķīmijterapeitisko līdzekļu iedarbību.

Šī šūnu līnija ir pazīstama ar heterozigotisko KRAS mutāciju 13. kodonā, kas ir bieži sastopama kolorektālā vēža gadījumā un ir saistīta ar vēža šūnu izdzīvošanu un proliferāciju. Turklāt DLD-1 ir APC gēna mutācijas, kas veicina Wnt signalizācijas ceļa deregulāciju, kas ir būtisks elements kolorektālā karcinogēnā. DLD-1 plaša izmantošana pētniecībā sniedz vērtīgu ieskatu audzēja uzvedībā, reakcijā uz zālēm un vēža ģenētikā, padarot to par būtisku modeli kolorektālā vēža pētniecībā un terapijas izstrādē.

Audums
Resnās zarnas
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
  • DLD 1
  • DLD1
  • CoCL3

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Plikām pelēm
Kariotips
2n = 46
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
15 stundas

04Identifikatori

Atsauce
DLD-1 (Cytion kataloga numurs 300220)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0248

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Keratīns
Vīrusi
Reversā transkriptāze negatīva
Produkti
Karcinoembrionālais antigēns (CEA) 0,5 ng/10 eksp6 šūnu/10 dienu, sārmainā fosfatāze

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 līdz 2 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
67 gadi