Mine otse sisu juurde
DLD-1 rakud
Kude
Colon
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
DLD 1, DLD1, CoCL3

Dokumendid

DLD-1 rakud

Cell line · Toote number 300220

DLD-1 on inimese kolorektaalse adenokartsinoomi rakuliin, mis on saadud täiskasvanud patsiendi distaalsest jämesooleosast. Need rakud on morfoloogiliselt epiteelrakud ja need olid ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

DLD-1 on inimese kolorektaalse adenokartsinoomi rakuliin, mis on saadud täiskasvanud patsiendi distaalsest käärsoolest. Need rakud on morfoloogiliselt epiteliaalsed ja need loodi algselt kolorektaalvähi mehhanismide ja patoloogia uurimiseks. DLD-1 rakke kasutatakse tavaliselt onkoloogilistes uuringutes, eelkõige uuringutes, mis keskenduvad vähi molekulaarbioloogiale, geeniekspressioonile ja erinevate kemoterapeutiliste ainete mõjule.

See rakuliin on tuntud heterosügootse KRAS-mutatsiooni poolest koodonis 13, mis on levinud kolorektaalvähi puhul ja mis on seotud vähirakkude ellujäämise ja proliferatsiooniga. Lisaks on DLD-1-l mutatsioonid APC geenis, mis aitab kaasa Wnt-signaaltee dereguleerimisele, mis on kriitiline element kolorektaalkartsinogeneesis. DLD-1 jõuline kasutamine teadusuuringutes annab väärtuslikke teadmisi kasvaja käitumise, ravivastuse ja vähigeneetika kohta, mistõttu on see oluline mudel kolorektaalvähi uurimisel ja ravimiarenduses.

Kude
Colon
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
  • DLD 1
  • DLD1
  • CoCL3

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Alasti hiirtel
Karyotüüp
2n = 46
Kahekordistumisaeg
15 tundi

04Tunnused

Viide
DLD-1 (Cytioni katalooginumber 300220)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0248

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Keratiin
Viirused
Reverse transkriptaasi negatiivne
Tooted
Kartsiinoembüooniline antigeen (CEA) 0,5 ng/10 exp6 rakku/10 päeva, leeliseline fosfataas

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 kuni 2 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
67 aastat