Přejít na obsah
Buňky DLD-1
Tkáň
Střeva
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
DLD 1, DLD1, CoCL3

Dokumenty

Buňky DLD-1

Cell line · Číslo výrobku 300220

DLD-1 je lidská buněčná linie adenokarcinomu tlustého střeva odvozená z distální části tlustého střeva dospělého pacienta. Tyto buňky mají epiteliální morfologii a byly ...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

DLD-1 je buněčná linie lidského kolorektálního adenokarcinomu odvozená z distálního tračníku dospělého pacienta. Tyto buňky mají epiteliální morfologii a původně byly založeny za účelem studia mechanismů a patologie kolorektálního karcinomu. Buňky DLD-1 se běžně používají v onkologickém výzkumu, zejména ve studiích zaměřených na molekulární biologii rakoviny, genovou expresi a účinky různých chemoterapeutik.

Tato buněčná linie je známá svou heterozygotní mutací KRAS v kodonu 13, která je běžným znakem kolorektálního karcinomu a podílí se na přežívání a proliferaci nádorových buněk. DLD-1 navíc vykazuje mutace v genu APC, což přispívá k deregulaci signální dráhy Wnt, která je kritickým prvkem v kolorektální karcinogenezi. Rozsáhlé využití DLD-1 ve výzkumu poskytuje cenné poznatky o chování nádoru, reakci na léky a genetice rakoviny, což z něj činí důležitý model pro výzkum kolorektálního karcinomu a vývoj léčebných postupů.

Tkáň
Střeva
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
  • DLD 1
  • DLD1
  • CoCL3

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
U nahých myší
Karyotyp
2n = 46
Doba zdvojnásobení
15 hodin

04Identifikátory

Citace
DLD-1 (katalogové číslo Cytion 300220)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0248

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
Keratin
Viry
Reverzní transkriptáza negativní
Produkty
Karcinoembryonální antigen (CEA) 0,5 ng/10 exp6 buněk/10 dní, alkalická fosfatáza

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 2 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
67 let