Przejdź do treści
Komórki DLD-1
Chusteczka
Colon
Choroba
Gruczolakorak
Synonimy
DLD 1, DLD1, CoCL3

Dokumenty

Komórki DLD-1

Cell line · Numer produktu 300220

DLD-1 to ludzka linia komórkowa gruczolakoraka jelita grubego, pochodząca z dystalnej części okrężnicy dorosłego pacjenta. Komórki te mają morfologię nabłonkową i zostały…

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

DLD-1 to ludzka linia komórek gruczolakoraka jelita grubego pochodząca z dystalnej części okrężnicy dorosłego pacjenta. Komórki te mają morfologię nabłonkową i początkowo zostały utworzone w celu badania mechanizmów i patologii raka jelita grubego. Komórki DLD-1 są powszechnie wykorzystywane w badaniach onkologicznych, w szczególności w badaniach skupiających się na biologii molekularnej raka, ekspresji genów i wpływie różnych środków chemioterapeutycznych.

Ta linia komórkowa znana jest z heterozygotycznej mutacji KRAS w kodonie 13, która jest powszechną cechą w raku jelita grubego, co wiąże się z jej wpływem na przeżycie i proliferację komórek nowotworowych. Dodatkowo, DLD-1 wykazuje mutacje w genie APC, przyczyniając się do deregulacji szlaku sygnałowego Wnt, krytycznego elementu w karcynogenezie jelita grubego. Szerokie zastosowanie DLD-1 w badaniach zapewnia cenny wgląd w zachowanie guza, odpowiedź na leki i genetykę raka, co czyni go istotnym modelem w badaniach nad rakiem jelita grubego i rozwoju terapii.

Chusteczka
Colon
Choroba
Gruczolakorak
Synonimy
  • DLD 1
  • DLD1
  • CoCL3

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
U nagich myszy
Karyotyp
2n = 46
Czas podwojenia
15 godzin

04Identyfikatory

Źródło
DLD-1 (numer katalogowy Cytion 300220)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0248

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
Keratyna
Wirusy
Odwrotna transkryptaza ujemna
Produkty
Antygen rakowo-płodowy (CEA) 0,5 ng/10 komórek exp6/10 dni, fosfataza alkaliczna

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 do 2 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
67 lat