Gå til innholdet
DLD-1-celler
Vev
Colon
Sykdom
Adenokarsinom
Synonymer
DLD 1, DLD1, CoCL3

Dokumenter

DLD-1-celler

Cell line · Produktnummer 300220

DLD-1 er en human cellelinje fra et adenokarsinom i tykktarmen, hentet fra den distale delen av tykktarmen hos en voksen pasient. Disse cellene har epitelial morfologi og ble …

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

DLD-1 er en human kolorektal adenokarsinomcellelinje som stammer fra den distale delen av tykktarmen til en voksen pasient. Cellene har epitelmorfologi og ble opprinnelig etablert for å studere mekanismer og patologi ved kolorektal kreft. DLD-1-celler brukes ofte i onkologisk forskning, særlig i studier som fokuserer på kreftsykdommens molekylærbiologi, genuttrykk og effekten av ulike kjemoterapeutiske midler.

Denne cellelinjen er kjent for sin heterozygote KRAS-mutasjon på kodon 13, som er et vanlig trekk ved kolorektal kreft, og som er involvert i kreftcellenes overlevelse og spredning. I tillegg har DLD-1 mutasjoner i APC-genet, noe som bidrar til deregulering av Wnt-signalveien, et kritisk element i kolorektal karsinogenese. Den robuste bruken av DLD-1 i forskning gir verdifull innsikt i tumoratferd, legemiddelrespons og kreftgenetikk, noe som gjør den til en viktig modell i forskning på kolorektal kreft og utvikling av behandling.

Vev
Colon
Sykdom
Adenokarsinom
Synonymer
  • DLD 1
  • DLD1
  • CoCL3

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
I nakne mus
Karyotype
2n = 46
Fordoblingstid
15 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
DLD-1 (Cytion katalognummer 300220)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0248

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
Keratin
Virus
Revers transkriptase negativ
Produkter
Karsinoembryonalt antigen (CEA) 0,5 ng/10 exp6 celler/10 dager, alkalisk fosfatase

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 til 2 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
67 år