Перейти до вмісту
Клітини DLD-1
Тканина
Двоєточие
Хвороба
Аденокарцинома
Синоніми
DLD 1, DLD1, CoCL3

Документи

Клітини DLD-1

Cell line · Номер товару 300220

DLD-1 — це клітинна лінія аденокарциноми товстої кишки людини, отримана з дистального відділу товстої кишки дорослого пацієнта. Ці клітини мають епітеліальну морфологію і були...

€430.00без урахування податків та вартості доставки

Налаштування / Рекомендації

Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

DLD-1 - це клітинна лінія колоректальної аденокарциноми людини, отримана з дистального відділу товстої кишки дорослого пацієнта. Ці клітини мають епітеліальну морфологію і спочатку були створені для вивчення механізмів та патології колоректального раку. Клітини DLD-1 широко використовуються в онкологічних дослідженнях, зокрема, в дослідженнях, присвячених молекулярній біології раку, експресії генів та впливу різних хіміотерапевтичних препаратів.

Ця клітинна лінія відома своєю гетерозиготною мутацією KRAS у кодоні 13, що є поширеною ознакою колоректального раку, яка впливає на виживання та проліферацію ракових клітин. Крім того, DLD-1 має мутації в гені APC, що сприяє дерегуляції сигнального шляху Wnt, критично важливого елемента в колоректальному канцерогенезі. Активне використання DLD-1 в дослідженнях дає цінну інформацію про поведінку пухлини, реакцію на лікування та генетику раку, що робить її життєво важливою моделлю в дослідженнях колоректального раку та терапевтичних розробках.

Тканина
Двоєточие
Хвороба
Аденокарцинома
Синоніми
  • DLD 1
  • DLD1
  • CoCL3

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Пухлиноутворювальний
У голих мишей
Каріотип
2n = 46
Час подвоєння
15 годин

04Ідентифікатори

Посилання
DLD-1 (номер за каталогом Cytion 300220)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0248

05Експресія та сприйнятливість

Експресія білків
Кератин
Віруси
Негативна зворотна транскриптаза
Продукція
Карциноембріональний антиген (СЕА) 0,5 нг/10 експ6 клітин/10 днів, лужна фосфатаза

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
1 до 2 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
67 років