Премини към съдържанието
CCK-81
Тъкан
Метастатичен
Заболяване
Аденокарцином на дебелото черво
Място на метастазите
Лимфен възел
Синоними
CCK81

Документи

CCK-81

Cell line · Номер на продукта 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия CCK-81 е модел на човешки колоректален аденокарцином, получен от първичен тумор. Тя се използва често в изследвания в областта на раковата биология, фокусирани върху злокачествени заболявания на стомашно-чревния тракт, и е охарактеризирана по отношение на различни генетични промени и профили на лекарствения отговор. Според функционалния скрининг на тумор-супресорните гени, CCK-81 експресира мутантния **TP53**, както е потвърдено чрез функционални тестове на базата на дрожди, като само около 6% от колониите показват транскрипционно активен p53 фенотип, което показва мутация с загуба на функция. Този мутационен статус съответства на туморогенния му произход и допринася за неговата значимост като модел за изучаване на колоректални ракови заболявания с дефицит на p53.

CCK-81 е включен и в основни сборници на ракови клетъчни линии, като Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), където е профилиран в множество омични слоеве, включително генна експресия, вариация в броя на копията, мутационен статус и лекарствена чувствителност. Включването му в тези набори от данни позволява интегрирани анализи на зависимостите на пътеките и терапевтичните уязвимости при различните подтипове на колоректален рак. Например, протеогеномното профилиране е показало, че клетъчните линии на колоректален рак, включително CCK-81, често проявяват нарушени сигнални пътища като Wnt/β-катенин и MAPK, което ги прави подходящи за прецизни онкологични проучвания, насочени към тези оси.

Тъкан
Метастатичен
Заболяване
Аденокарцином на дебелото черво
Място на метастазите
Лимфен възел
Синоними
  • CCK81

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Време за удвояване
45 часа

04Идентификатори

Източник
CCK-81 (каталожен номер на Cytion 305757)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_2873

05Проява и предразположеност

Мутационен профил
Мутация: FBXW7, проста, p.Arg465Cys (c.1393C>T), хетерозиготна (DepMap=ACH-000963).Мутация, PIK3CA, проста, p.Cys420Arg (c.1258T>C), хетерозиготна (DepMap=ACH-000963). Мутация, TP53, проста, p.Pro278His (c.833C>A), хетерозиготна

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Добавете към средата 10 % FBS, 1 % NEAA и 1 mM натриев пируват
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 до 3 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
62 години
Етническа принадлежност
Японски