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CCK-81
Tissue
Métastatique
Disease
Adénocarcinome du côlon
Metastatic site
Ganglion lymphatique
Synonyms
CCK81

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CCK-81

Cell line · Product number 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

US$500.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La lignée cellulaire CCK-81 est un modèle d’adénocarcinome colorectal humain dérivé d’une tumeur primaire. Elle est couramment utilisée dans les études de biologie du cancer axées sur les tumeurs malignes gastro-intestinales et a été caractérisée pour diverses altérations génétiques et divers profils de réponse aux médicaments. D’après un criblage fonctionnel des gènes suppresseurs de tumeurs, la lignée CCK-81 exprime une forme mutante de **TP53**, comme l’ont confirmé des essais fonctionnels à base de levure; seulement environ 6 % des colonies présentent un phénotype p53 transcriptionnellement actif, ce qui indique une mutation avec perte de fonction. Ce statut mutationnel correspond à son origine tumorigène et contribue à sa pertinence en tant que modèle pour l’étude des cancers colorectaux déficients en p53.

La lignée CCK-81 a également été intégrée à d’importants recueils de lignées cellulaires cancéreuses, tels que la Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), où son profil a été établi à travers plusieurs niveaux omiques, notamment l’expression génique, la variation du nombre de copies, le statut mutationnel et la sensibilité aux médicaments. Son inclusion dans ces ensembles de données permet des analyses intégrées des dépendances des voies de signalisation et des vulnérabilités thérapeutiques parmi les sous-types de cancer colorectal. Par exemple, le profilage protéogénomique a mis en évidence que les lignées cellulaires de cancer colorectal, y compris la CCK-81, présentent souvent des voies de signalisation dérégulées telles que Wnt/β-caténine et MAPK, ce qui les rend appropriées pour des études en oncologie de précision ciblant ces axes.

Tissue
Métastatique
Disease
Adénocarcinome du côlon
Metastatic site
Ganglion lymphatique
Synonyms
  • CCK81

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Doubling time
45 heures

04Identifiers

Citation
CCK-81 (numéro de catalogue Cytion 305757)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05Expression and susceptibility

Mutational profile
Mutation : FBXW7, simple, p.Arg465Cys (c.1393C>T), hétérozygote (DepMap=ACH-000963).Mutation, PIK3CA, simple, p.Cys420Arg (c.1258T>C), hétérozygote (DepMap=ACH-000963).Mutation, TP53, simple, p.Pro278His (c.833C>A), hétérozygote

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), contenant : 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, et EBSS (référence Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter au milieu 10 % de FBS, 1 % de NEAA et 1 mM de pyruvate de sodium
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Seeding density
de 1 à 3 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
62 ans
Ethnicity
Japonais