Skip to content
CCK-81
Tissue
גרורתי
Disease
אדנוקרצינומה של המעי הגס
Metastatic site
בלוטת לימפה
Synonyms
CCK81

Documents

CCK-81

Cell line · Product number 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

US$500.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים CCK-81 הוא מודל של אדנוקרצינומה של המעי הגס האנושי, שמקורו בגידול ראשוני. הוא נמצא בשימוש נרחב במחקרים בתחום ביולוגיה הסרטן המתמקדים בגידולים ממאירים במערכת העיכול, ואופיין מבחינת שינויים גנטיים שונים ופרופילי תגובה לתרופות. על פי סריקה תפקודית של גנים מדכאי גידולים, CCK-81 מבטא **TP53** מוטנטי, כפי שאושר על ידי בדיקות תפקודיות מבוססות שמרים, כאשר רק כ-6% מהמושבות מציגות פנוטיפ p53 פעיל מבחינה טרנסקריפטומית, מה שמעיד על מוטציה של אובדן תפקוד. מצב מוטציה זה תואם את מקורו הטומורגני ותורם לרלוונטיות שלו כמודל לחקר סרטן המעי הגס עם חוסר ב-p53.

CCK-81 נכלל גם באנציקלופדיות מרכזיות של קווי תאים סרטניים, כגון Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), שם הוא תועד על פני שכבות אומיות מרובות, כולל ביטוי גנים, וריאציה במספר העותקים, מצב המוטציה ורגישות לתרופות. הכללתו במאגרי נתונים אלה מאפשרת ניתוחים משולבים של תלות במסלולים ונקודות תורפה טיפוליות על פני תתי-סוגים של סרטן המעי הגס. לדוגמה, פרופיל פרוטאוגנומי הדגיש כי קווי תאים של סרטן המעי הגס, כולל CCK-81, מפגינים לעתים קרובות מסלולי איתות לא מוסדרים כגון Wnt/β-catenin ו-MAPK, מה שהופך אותם למתאימים למחקרים אונקולוגיים מדויקים המכוונים לצירים אלה.

Tissue
גרורתי
Disease
אדנוקרצינומה של המעי הגס
Metastatic site
בלוטת לימפה
Synonyms
  • CCK81

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Doubling time
45 שעות

04Identifiers

Citation
CCK-81 (מספר קטלוגי של Cytion: 305757)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05Expression and susceptibility

Mutational profile
מוטציה: FBXW7, פשוטה, p.Arg465Cys (c.1393C>T), הטרוזיגוטית (DepMap=ACH-000963).מוטציה, PIK3CA, פשוטה, p.Cys420Arg (c.1258T>C), הטרוזיגוטית (DepMap=ACH-000963). מוטציה, TP53, פשוטה, p.Pro278His (c.833C>A), הטרוזיגוטית

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
יש להוסיף למדיום 10% FBS, 1% NEAA ו-1 מ"מ פירובט נתרן
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 עד 3 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
62 שנים
Ethnicity
יפנית