Skip to content
CCK-81
Tissue
แพร่กระจาย
Disease
มะเร็งลำไส้ใหญ่ชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา
Metastatic site
ต่อมน้ำเหลือง
Synonyms
CCK81

Documents

CCK-81

Cell line · Product number 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายพันธุ์เซลล์ CCK-81 เป็นแบบจำลองมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมาของมนุษย์ที่ได้มาจากเนื้องอกปฐมภูมิ โดยมักใช้ในการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งที่เน้นไปที่มะเร็งในระบบทางเดินอาหารและได้รับการศึกษาลักษณะทางพันธุกรรมและการตอบสนองต่อยาหลายชนิดแล้ว จากการคัดกรองการทำงานของยีนกดการเกิดเนื้องอก พบว่า CCK-81 แสดงการกลายพันธุ์ของ **TP53** ซึ่งได้รับการยืนยันโดยการทดสอบการทำงานบนยีสต์ โดยมีเพียงประมาณ 6% ของโคโลนีที่แสดงลักษณะ p53 ที่มีการถอดรหัสอย่างแข็งขัน ซึ่งบ่งชี้ถึงการกลายพันธุ์ที่ทำให้สูญเสียการทำงาน สถานะการกลายพันธุ์นี้สอดคล้องกับแหล่งกำเนิดที่เป็นเนื้องอกและมีส่วนสำคัญในการทำให้เป็นแบบจำลองสำหรับการศึกษาโรคมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักที่ขาด p53

CCK-81 ยังได้รับการบรรจุไว้ในสารานุกรมสายพันธุ์เซลล์มะเร็งหลัก เช่น Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) ซึ่งมีการวิเคราะห์ข้อมูลในหลายระดับเชิงลึก รวมถึงการแสดงออกของยีน ความแปรปรวนของจำนวนสำเนาของยีน สถานะการกลายพันธุ์ และความไวต่อยา การรวมข้อมูลนี้ไว้ในชุดข้อมูลดังกล่าวช่วยให้สามารถวิเคราะห์แบบบูรณาการเกี่ยวกับความพึ่งพาของเส้นทางชีวภาพและจุดอ่อนในการรักษาในมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดย่อยต่างๆ ได้ ตัวอย่างเช่น การวิเคราะห์โปรตีโอมิกส์เชิงโปรตีโอกโนมิกได้เน้นย้ำว่าเซลล์ไลน์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก รวมถึง CCK-81 มักแสดงเส้นทางการส่งสัญญาณที่ผิดปกติ เช่น Wnt/β-catenin และ MAPK ทำให้เหมาะสมสำหรับการศึกษาด้านมะเร็งวิทยาแบบแม่นยำที่มุ่งเป้าไปที่แกนเหล่านี้

Tissue
แพร่กระจาย
Disease
มะเร็งลำไส้ใหญ่ชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา
Metastatic site
ต่อมน้ำเหลือง
Synonyms
  • CCK81

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Doubling time
45 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
CCK-81 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305757)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05Expression and susceptibility

Mutational profile
การกลายพันธุ์: FBXW7, ง่าย, p.Arg465Cys (c.1393C>T), Heterozygous (DepMap=ACH-000963).การกลายพันธุ์, PIK3CA, แบบง่าย, p.Cys420Arg (c.1258T>C), ชนิดเฮเทอโรไซโกต (DepMap=ACH-000963). การกลายพันธุ์, TP53, แบบง่าย, p.Pro278His (c.833C>A), ชนิดเฮเทอโรไซโกต

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, NEAA 1%, โซเดียมไพรูแวต 1mM
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 ถึง 3 x 104 เซลล์/เซนติเมตร²
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
62 ปี
Ethnicity
ญี่ปุ่น