Přejít na obsah
CCK-81
Tkáň
Metastatické
Nemoc
Adenokarcinom tlustého střeva
Místo metastázy
Lymfatická uzlina
Synonyma
CCK81

Dokumenty

CCK-81

Cell line · Číslo výrobku 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie CCK-81 je model lidského adenokarcinomu tlustého střeva a konečníku odvozený z primárního nádoru. Běžně se používá ve studiích biologických aspektů rakoviny zaměřených na zhoubné nádory gastrointestinálního traktu a byla charakterizována z hlediska různých genetických změn a profilů reakce na léčiva. Podle funkčního screeningu tumor supresorových genů exprimuje CCK-81 mutovaný **TP53**, což potvrzují funkční testy na kvasinkách, přičemž pouze asi 6 % kolonií vykazuje transkripčně aktivní fenotyp p53, což naznačuje mutaci se ztrátou funkce. Tento mutační status odpovídá jeho tumorigennímu původu a přispívá k jeho relevanci jako modelu pro studium kolorektálních karcinomů s deficitem p53.

CCK-81 byla také zařazena do hlavních kompendií nádorových buněčných linií, jako je Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), kde byla profilována napříč několika omickými vrstvami, včetně genové exprese, variace počtu kopií, mutačního statusu a citlivosti na léky. Její zařazení do těchto datových sad umožňuje integrované analýzy závislostí na signálních drahách a terapeutických zranitelností napříč podtypy kolorektálního karcinomu. Například proteogenomické profilování zdůraznilo, že buněčné linie kolorektálního karcinomu, včetně CCK-81, často vykazují dysregulované signální dráhy, jako jsou Wnt/β-katenin a MAPK, což je činí vhodnými pro studie přesné onkologie zaměřené na tyto osy.

Tkáň
Metastatické
Nemoc
Adenokarcinom tlustého střeva
Místo metastázy
Lymfatická uzlina
Synonyma
  • CCK81

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Doba zdvojnásobení
45 hodin

04Identifikátory

Citace
CCK-81 (katalogové číslo Cytion 305757)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05Exprese a náchylnost

Mutační profil
Mutace: FBXW7, jednoduchá, p.Arg465Cys (c.1393C>T), heterozygotní (DepMap=ACH-000963).Mutace, PIK3CA, jednoduchá, p.Cys420Arg (c.1258T>C), heterozygotní (DepMap=ACH-000963). Mutace, TP53, jednoduchá, p.Pro278His (c.833C>A), heterozygotní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, 1 % NEAA a 1 mM sodného pyruvátu
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 3 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
62 let
Etnická příslušnost
Japonský