الانتقال إلى المحتوى
CCK-81
الأنسجة
النقيلي
المرض
سرطان القولون الغدي
موقع الانتشار
العقدة اللمفاوية
المرادفات
CCK81

المستندات

CCK-81

Cell line · رقم المنتج 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

سلسلة الخلايا CCK-81 هي نموذج لسرطان الغدة الدرقية القولوني البشري المستمد من ورم أولي. وهي تُستخدم عادةً في دراسات بيولوجيا السرطان التي تركز على الأورام الخبيثة في الجهاز الهضمي، وقد تم تحديد خصائصها من حيث التغيرات الجينية المختلفة وخصائص الاستجابة للأدوية. وفقًا للفحص الوظيفي لجينات كابحة الأورام، يعبر CCK-81 عن **TP53** متحور، كما تم تأكيده من خلال الاختبارات الوظيفية القائمة على الخميرة، حيث أظهرت حوالي 6٪ فقط من المستعمرات النمط الظاهري p53 النشط من حيث النسخ، مما يشير إلى طفرة فقدان الوظيفة. يتوافق وضع هذه الطفرة مع أصلها المسبب للأورام ويساهم في أهميتها كنموذج لدراسة سرطانات القولون والمستقيم التي تعاني من نقص p53.

كما تم إدراج CCK-81 في مجموعات خطوط الخلايا السرطانية الرئيسية مثل موسوعة خطوط الخلايا السرطانية (CCLE)، حيث تم تحليلها عبر طبقات أوميك متعددة بما في ذلك التعبير الجيني، وتباين عدد النسخ، وحالة الطفرة، وحساسية الأدوية. ويسمح إدراجها في مجموعات البيانات هذه بإجراء تحليلات متكاملة لتبعيات المسارات ونقاط الضعف العلاجية عبر أنواع سرطان القولون والمستقيم الفرعية. على سبيل المثال، أبرزت دراسة الجينوم البروتيني أن سلالات خلايا سرطان القولون والمستقيم، بما في ذلك CCK-81، غالبًا ما تظهر مسارات إشارات غير منظمة مثل Wnt/β-catenin و MAPK، مما يجعلها مناسبة لدراسات طب الأورام الدقيق التي تستهدف هذه المحاور.

الأنسجة
النقيلي
المرض
سرطان القولون الغدي
موقع الانتشار
العقدة اللمفاوية
المرادفات
  • CCK81

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

زمن المضاعفة
45 ساعة

04المعرّفات

المرجع
CCK-81 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305757)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_2873

05التعبير والقابلية للإصابة

الأنماط الطفريّة
الطفرة: FBXW7، بسيطة، p.Arg465Cys (c.1393C>T)، متغايرة الزيجوت (DepMap=ACH-000963).طفرة، PIK3CA، بسيطة، p.Cys420Arg (c.1258T>C)، متغايرة الزيجوت (DepMap=ACH-000963). طفرة، TP53، بسيطة، p.Pro278His (c.833C>A)، متغايرة الزيجوت

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
أضف إلى الوسط 10% من مصل الدم البشري (FBS)، و1% من الأحماض الأمينية غير الأساسية (NEAA)، و1 مليمولار من بيروفات الصوديوم
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 إلى 3 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
62 سنة
الأصل العرقي
ياباني