Ga naar de inhoud
CCK-81
Weefsel
Uitgezaaid
Ziekte
Colonadenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Lymfeklier
Synoniemen
CCK81

Documenten

CCK-81

Cell line · Productnummer 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De CCK-81-cellijn is een model van humaan colorectaal adenocarcinoom dat is afgeleid van een primaire tumor. Deze cellijn wordt veelvuldig gebruikt in kankerbiologisch onderzoek naar maligniteiten van het maag-darmstelsel en is gekarakteriseerd op basis van diverse genetische veranderingen en profielen van de respons op geneesmiddelen. Volgens functionele screening van tumorsuppressorgenen brengt CCK-81 het gemuteerde **TP53** tot expressie, zoals bevestigd door op gist gebaseerde functionele assays, waarbij slechts ongeveer 6% van de kolonies het transcriptioneel actieve p53-fenotype vertoont, wat wijst op een functieverliesmutatie. Deze mutatiestatus komt overeen met de tumorogene oorsprong ervan en draagt bij aan de relevantie ervan als model voor het bestuderen van p53-deficiënte colorectale kankers.

CCK-81 is ook opgenomen in belangrijke compendia van kankercellijnen, zoals de Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), waar het is geprofileerd over meerdere omics-lagen, waaronder genexpressie, variatie in kopieaantal, mutatiestatus en gevoeligheid voor geneesmiddelen. De opname in deze datasets maakt geïntegreerde analyses mogelijk van afhankelijkheid van signaalroutes en therapeutische kwetsbaarheden bij verschillende subtypes van colorectale kanker. Zo heeft proteogenomische profilering bijvoorbeeld aangetoond dat colorectale kankercellijnen, waaronder CCK-81, vaak ontregelde signaalroutes vertonen, zoals Wnt/β-catenine en MAPK, waardoor ze geschikt zijn voor precisie-oncologiestudies die zich op deze assen richten.

Weefsel
Uitgezaaid
Ziekte
Colonadenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Lymfeklier
Synoniemen
  • CCK81

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Verdubbelingstijd
45 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
CCK-81 (Cytion-catalogusnummer 305757)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05Expressie en vatbaarheid

Mutatieprofiel
Mutatie: FBXW7, Enkelvoudig, p.Arg465Cys (c.1393C>T), heterozygoot (DepMap=ACH-000963).Mutatie, PIK3CA, eenvoudig, p.Cys420Arg (c.1258T>C), heterozygoot (DepMap=ACH-000963). Mutatie, TP53, eenvoudig, p.Pro278His (c.833C>A), heterozygoot

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Voeg aan het medium 10% FBS, 1% NEAA en 1 mM natriumpyruvaat toe
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 tot 3 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
62 jaar
Etnische afkomst
Japans