Preskoči na vsebino
CCK-81
Tkivo
Metastatski
Bolezen
Adenokarcinom debelega črevesa
Mesto metastaze
Limfna vozlišča
Sinonimi
CCK81

Dokumenti

CCK-81

Cell line · Številka izdelka 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija CCK-81 je model človeškega kolorektalnega adenokarcinoma, pridobljen iz primarnega tumorja. Pogosto se uporablja v raziskavah rakave biologije, ki se osredotočajo na maligne bolezni prebavil, pri čemer so bile pri njej opredeljene različne genetske spremembe in profili odziva na zdravila. Glede na funkcionalno presejanje tumor supresornih genov, CCK-81 izraža mutirani **TP53**, kar so potrdili funkcionalni testi na kvasovkah, pri čemer le okoli 6 % kolonij kaže transkripcijsko aktiven p53 fenotip, kar kaže na mutacijo z izgubo funkcije. Ta mutacijski status je skladen z njegovim tumorigenim izvorom in prispeva k njegovi relevantnosti kot modela za preučevanje kolorektalnih rakov z pomanjkanjem p53.

CCK-81 je bil vključen tudi v glavne kompendije rakavih celičnih linij, kot je Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), kjer je bil profiliran na več omičnih ravneh, vključno z izražanjem genov, variacijo števila kopij, statusom mutacije in občutljivostjo na zdravila. Njegova vključitev v te podatkovne nize omogoča integrirane analize odvisnosti poti in terapevtskih ranljivosti med podtipi kolorektalnega raka. Na primer, proteogenomsko profiliranje je poudarilo, da celične linije raka debelega črevesa, vključno s CCK-81, pogosto kažejo motene signalne poti, kot sta Wnt/β-katenin in MAPK, zaradi česar so primerne za študije precizne onkologije, usmerjene v te osi.

Tkivo
Metastatski
Bolezen
Adenokarcinom debelega črevesa
Mesto metastaze
Limfna vozlišča
Sinonimi
  • CCK81

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Čas podvojitve
45 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
CCK-81 (kataloška številka Cytion 305757)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05Izražanje in dovzetnost

Profil mutacij
Mutacija: FBXW7, enostavna, p.Arg465Cys (c.1393C>T), heterozigotna (DepMap=ACH-000963).Mutacija, PIK3CA, preprosta, p.Cys420Arg (c.1258T>C), heterozigotna (DepMap=ACH-000963). Mutacija, TP53, preprosta, p.Pro278His (c.833C>A), heterozigotna

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojilnemu mediju dodajte 10 % FBS, 1 % NEAA in 1 mM natrijevega piruvata
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 do 3 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
62 let
Etnična pripadnost
Japonski