CCK-81
Cell line · Product number 305757
The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...
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01General information
- Description
CCK-81 細胞系是一種源自原發性腫瘤的人類結直腸腺癌模型。該細胞系常被用於針對胃腸道惡性腫瘤的癌症生物學研究,並已針對各種基因突變及藥物反應特徵進行了特性分析。 根據腫瘤抑制基因的功能篩選結果,CCK-81 表達突變型 **TP53**,此結果經酵母功能檢測確認,其中僅約 6% 的菌落呈現轉錄活性的 p53 表型,顯示為功能喪失型突變。 此突變狀態與其腫瘤起源相符,並強化了其作為研究 p53 缺失型結直腸癌模型的相關性。
CCK-81 亦已被收錄於《癌症細胞系百科全書》(CCLE)等主要癌症細胞系彙編中,其中已針對其進行了橫跨基因表達、拷貝數變異、突變狀態及藥物敏感性等多層面組學分析。 將其納入這些資料集,便能對各結直腸癌亞型的路徑依賴性及治療脆弱性進行整合分析。 例如,蛋白質基因組學分析顯示,包括 CCK-81 在內的結直腸癌細胞系,往往會出現 Wnt/β-catenin 和 MAPK 等訊號傳導路徑的調控失調,使其成為針對這些軸線進行精準腫瘤學研究的理想對象。
- Tissue
- 轉移性
- Disease
- 結腸腺癌
- Metastatic site
- 淋巴結
- Synonyms
- CCK81
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Doubling time
- 45 小時
04Identifiers
- Citation
- CCK-81(Cytion 型號 305757)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2873
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- 突變:FBXW7,單一突變,p.Arg465Cys (c.1393C>T),雜合子(DepMap=ACH-000963)。突變,PIK3CA,簡單型,p.Cys420Arg (c.1258T>C),雜合子(DepMap=ACH-000963)。突變,TP53,簡單型,p.Pro278His (c.833C>A),雜合子
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM(MEM Eagle),含 2 mM L-谷氨醯胺,含 2.2 g/L NaHCO₃,含 EBSS(Cytion 產品編號 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% FBS、1% NEAA 及 1mM 丙酮酸鈉
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Seeding density
- 1 至 3 × 10⁴ 個細胞/cm²
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 62年
- Ethnicity
- 日文
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Disclaimer
- 本產品所提供的細胞僅供體外實驗室研究之用,不得用於臨床或診斷用途,亦不得施予人類或用於獸醫用途。使用者必須遵守所有適用於研究環境中處理及使用這些細胞的相關指引與法規。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
