
- Tissue
- Metastático
- Disease
- Adenocarcinoma do cólon
- Metastatic site
- Nódulo linfático
- Synonyms
- CCK81
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CCK-81
Cell line · Product number 305757
The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...
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01General information
- Description
A linhagem celular CCK-81 é um modelo de adenocarcinoma colorretal humano derivado de um tumor primário. É comumente utilizada em estudos de biologia do câncer com foco em neoplasias malignas do trato gastrointestinal e já foi caracterizada quanto a diversas alterações genéticas e perfis de resposta a medicamentos. De acordo com a triagem funcional de genes supressores de tumor, a CCK-81 expressa o **TP53** mutante, conforme confirmado por ensaios funcionais baseados em levedura, com apenas cerca de 6% das colônias apresentando o fenótipo p53 transcripcionalmente ativo, indicando uma mutação com perda de função. Esse status de mutação está alinhado com sua origem tumorigênica e contribui para sua relevância como modelo para o estudo de cânceres colorretais com deficiência de p53.
A CCK-81 também foi incluída nos principais compêndios de linhagens celulares cancerosas, como a Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), onde seu perfil foi traçado em múltiplas camadas ômicas, incluindo expressão gênica, variação do número de cópias, status de mutação e sensibilidade a medicamentos. Sua inclusão nesses conjuntos de dados permite análises integradas de dependências de vias de sinalização e vulnerabilidades terapêuticas entre os subtipos de câncer colorretal. Por exemplo, o perfil proteogenômico destacou que as linhagens celulares de câncer colorretal, incluindo a CCK-81, frequentemente apresentam vias de sinalização desreguladas, como Wnt/β-catenina e MAPK, tornando-as adequadas para estudos de oncologia de precisão direcionados a esses eixos.
- Tissue
- Metastático
- Disease
- Adenocarcinoma do cólon
- Metastatic site
- Nódulo linfático
- Synonyms
- CCK81
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Doubling time
- 45 horas
04Identifiers
- Citation
- CCK-81 (número de catálogo da Cytion 305757)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2873
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- Mutação: FBXW7, simples, p.Arg465Cys (c.1393C>T), heterozigótica (DepMap=ACH-000963).Mutação, PIK3CA, simples, p.Cys420Arg (c.1258T>C), heterozigótica (DepMap=ACH-000963).Mutação, TP53, simples, p.Pro278His (c.833C>A), heterozigótica
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), contendo: 2 mM de L-glutamina, contendo: 2,2 g/L de NaHCO₃, contendo: EBSS (número de artigo da Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione ao meio 10% de FBS, 1% de NEAA e 1 mM de piruvato de sódio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Seeding density
- 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 62 anos
- Ethnicity
- Japonês
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Disclaimer
- Nossas células são fornecidas exclusivamente para fins de pesquisa laboratorial in vitro e não se destinam ao uso clínico ou diagnóstico, nem devem ser administradas a seres humanos ou utilizadas para fins veterinários. Os usuários devem cumprir todas as diretrizes e regulamentações aplicáveis ao manuseio e uso dessas células em um ambiente de pesquisa.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes