Μετάβαση στο περιεχόμενο
CCK-81
Ιστός
Μεταστατικό
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα του παχέος εντέρου
Θέση μετάστασης
Λεμφαδένας
Συνώνυμα
CCK81

Έγγραφα

CCK-81

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά CCK-81 αποτελεί μοντέλο ανθρώπινου αδενοκαρκινώματος του παχέος εντέρου που προέρχεται από πρωτογενή όγκο. Χρησιμοποιείται ευρέως σε μελέτες βιολογίας του καρκίνου με έμφαση στις κακοήθειες του γαστρεντερικού συστήματος και έχει χαρακτηριστεί ως προς διάφορες γενετικές μεταλλάξεις και προφίλ ανταπόκρισης στα φάρμακα. Σύμφωνα με τη λειτουργική διαλογή των γονιδίων καταστολής όγκων, η CCK-81 εκφράζει το μεταλλαγμένο **TP53**, όπως επιβεβαιώθηκε από λειτουργικές δοκιμές με βάση τη μαγιά, με μόνο περίπου το 6% των αποικιών να εμφανίζουν μεταγραφικά ενεργό φαινότυπο p53, υποδηλώνοντας μια μετάλλαξη απώλειας λειτουργίας. Αυτή η κατάσταση μετάλλαξης ευθυγραμμίζεται με την ογκογόνο προέλευσή της και συμβάλλει στη σημασία της ως μοντέλου για τη μελέτη καρκίνων του παχέος εντέρου με έλλειψη p53.

Το CCK-81 έχει επίσης συμπεριληφθεί σε σημαντικές συλλογές καρκινικών κυτταρικών σειρών, όπως η Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), όπου έχει προφίλ σε πολλαπλά επίπεδα ομικών δεδομένων, συμπεριλαμβανομένης της γονιδιακής έκφρασης, της διακύμανσης του αριθμού αντιγράφων, της κατάστασης της μετάλλαξης και της ευαισθησίας στα φάρμακα. Η συμπερίληψή του σε αυτά τα σύνολα δεδομένων επιτρέπει ολοκληρωμένες αναλύσεις των εξαρτήσεων των μονοπατιών και των θεραπευτικών ευπαθειών σε όλους τους υποτύπους του καρκίνου του παχέος εντέρου. Για παράδειγμα, η πρωτεογονιδιωματική ανάλυση έχει επισημάνει ότι οι κυτταρικές σειρές καρκίνου του παχέος εντέρου, συμπεριλαμβανομένης της CCK-81, συχνά παρουσιάζουν δυσλειτουργικές οδούς σηματοδότησης, όπως οι Wnt/β-κατενίνη και MAPK, καθιστώντας τις κατάλληλες για μελέτες ογκολογίας ακριβείας που στοχεύουν σε αυτούς τους άξονες.

Ιστός
Μεταστατικό
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα του παχέος εντέρου
Θέση μετάστασης
Λεμφαδένας
Συνώνυμα
  • CCK81

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Χρόνος διπλασιασμού
45 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
CCK-81 (αριθμός καταλόγου Cytion 305757)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_2873

05Έκφραση και ευαισθησία

Προφίλ μεταλλάξεων
Μεταλλαγή: FBXW7, απλή, p.Arg465Cys (c.1393C>T), ετερόζυγη (DepMap=ACH-000963).Μετάλλαξη, PIK3CA, Απλή, p.Cys420Arg (c.1258T>C), Ετερόζυγη (DepMap=ACH-000963). Μετάλλαξη, TP53, Απλή, p.Pro278His (c.833C>A), Ετερόζυγη

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-γλουταμίνη, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (αριθμός άρθρου Cytion 820100a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Προσθέστε στο μέσο 10% FBS, 1% NEAA, 1 mM πυρουβικό νάτριο
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 έως 3 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
62 χρόνια
Εθνικότητα
Ιαπωνικά