Tartalomra ugrás
CCK-81
Szövet
Metasztatikus
Betegség
Vastagbél adenokarcinóma
Áttétes hely
Nyirokcsomó
Szinonimák
CCK81

Dokumentumok

CCK-81

Cell line · Termékszám 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A CCK-81 sejtvonal egy elsődleges daganatból származó humán vastagbél-adenokarcinóma modell. Gyakran alkalmazzák a gyomor-bélrendszeri rosszindulatú daganatokra összpontosító rákbiológiai kutatásokban, és számos genetikai eltérést, valamint gyógyszerreakciós profilt jellemeztek benne. A tumor szuppresszor gének funkcionális szűrése szerint a CCK-81 mutáns **TP53**-at expresszál, amit élesztő alapú funkcionális vizsgálatok is megerősítettek: a kolóniák csupán körülbelül 6%-a mutat transzkripcionálisan aktív p53 fenotípust, ami funkcióvesztéses mutációra utal. Ez a mutációs státusz összhangban áll a vonal tumorigenikus eredetével, és hozzájárul ahhoz, hogy a p53-hiányos kolorektális rákok tanulmányozásának modelljeként releváns legyen.

A CCK-81-et felvették a főbb ráksejtvonal-kompendiumokba is, például a Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) adatbázisba, ahol több omikális rétegben is profilozták, beleértve a génexpressziót, a kópiaszám-variációt, a mutációs státuszt és a gyógyszerérzékenységet. Ezen adatkészletekbe való felvétele lehetővé teszi a jelátviteli útvonalaktól való függőségek és a terápiás sebezhetőségek integrált elemzését a kolorektális rák altípusai között. Például a proteogenomikai profilalkotás rávilágított arra, hogy a vastagbélrákos sejtvonalak, beleértve a CCK-81-et is, gyakran mutatnak szabályozatlan jelátviteli útvonalakat, mint például a Wnt/β-katenin és a MAPK, ami alkalmassá teszi őket az ezeket a tengelyeket célzó precíziós onkológiai tanulmányokhoz.

Szövet
Metasztatikus
Betegség
Vastagbél adenokarcinóma
Áttétes hely
Nyirokcsomó
Szinonimák
  • CCK81

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Kettőzési idő
45 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
CCK-81 (Cytion katalógusszám: 305757)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05Kifejeződés és fogékonyság

Mutációs profil
Mutáció: FBXW7, egyszerű, p.Arg465Cys (c.1393C>T), heterozigóta (DepMap=ACH-000963).Mutáció, PIK3CA, egyszerű, p.Cys420Arg (c.1258T>C), heterozigóta (DepMap=ACH-000963). Mutáció, TP53, egyszerű, p.Pro278His (c.833C>A), heterozigóta

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-sel, 1% NEAA-val és 1 mM nátrium-piruváttal
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1–3 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
62 év
Etnikai hovatartozás
Japán