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CCK-81
Tissue
Metastático
Disease
Adenocarcinoma de colon
Metastatic site
Ganglio linfático
Synonyms
CCK81

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CCK-81

Cell line · Product number 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

US$500.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La línea celular CCK-81 es un modelo de adenocarcinoma colorrectal humano derivado de un tumor primario. Se utiliza comúnmente en estudios de biología del cáncer centrados en neoplasias malignas gastrointestinales y se ha caracterizado por diversas alteraciones genéticas y perfiles de respuesta a los fármacos. De acuerdo con el cribado funcional de los genes supresores de tumores, la línea CCK-81 expresa el gen **TP53** mutado, tal como lo confirman los ensayos funcionales basados en levadura, en los que solo alrededor del 6 % de las colonias muestran el fenotipo de p53 transcripcionalmente activo, lo que indica una mutación con pérdida de función. Este estado de mutación concuerda con su origen tumorigénico y contribuye a su relevancia como modelo para el estudio de los cánceres colorrectales con deficiencia de p53.

La CCK-81 también se ha incluido en los principales compendios de líneas celulares cancerosas, como la Enciclopedia de Líneas Celulares Cancerosas (CCLE), donde se ha perfilado a través de múltiples capas ómicas, incluyendo la expresión génica, la variación en el número de copias, el estado de mutación y la sensibilidad a los fármacos. Su inclusión en estos conjuntos de datos permite realizar análisis integrados de las dependencias de las vías de señalización y las vulnerabilidades terapéuticas en los distintos subtipos de cáncer colorrectal. Por ejemplo, el perfil proteogenómico ha destacado que las líneas celulares de cáncer colorrectal, incluida la CCK-81, a menudo presentan vías de señalización desreguladas, como Wnt/β-catenina y MAPK, lo que las hace adecuadas para estudios de oncología de precisión dirigidos a estos ejes.

Tissue
Metastático
Disease
Adenocarcinoma de colon
Metastatic site
Ganglio linfático
Synonyms
  • CCK81

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Doubling time
45 horas

04Identifiers

Citation
CCK-81 (número de catálogo de Cytion 305757)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05Expression and susceptibility

Mutational profile
Mutación: FBXW7, simple, p.Arg465Cys (c.1393C>T), heterocigótica (DepMap=ACH-000963).Mutación, PIK3CA, simple, p.Cys420Arg (c.1258T>C), heterocigótica (DepMap=ACH-000963).Mutación, TP53, simple, p.Pro278His (c.833C>A), heterocigótica

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), con: 2 mM de L-glutamina, con: 2,2 g/L de NaHCO₃, con: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS, un 1 % de NEAA y 1 mM de piruvato de sodio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Seeding density
De 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Fluid renewal
De 2 a 3 veces por semana
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Donor age
62 años
Ethnicity
Japonés