Skip to content
CCK-81
Tissue
Di căn
Disease
Ung thư tuyến đại tràng
Metastatic site
Hạch bạch huyết
Synonyms
CCK81

Documents

CCK-81

Cell line · Product number 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào CCK-81 là một mô hình ung thư biểu mô tuyến đại trực tràng ở người được phân lập từ khối u nguyên phát. Dòng tế bào này thường được sử dụng trong các nghiên cứu sinh học ung thư tập trung vào các khối u ác tính đường tiêu hóa và đã được đặc trưng hóa về các biến đổi di truyền cũng như các đặc điểm đáp ứng với thuốc. Theo kết quả sàng lọc chức năng của các gen ức chế khối u, CCK-81 biểu hiện gen **TP53** đột biến, được xác nhận bằng các xét nghiệm chức năng dựa trên nấm men, với chỉ khoảng 6% các khuẩn lạc biểu hiện kiểu hình p53 hoạt động về mặt phiên mã, cho thấy sự đột biến mất chức năng. Tình trạng đột biến này phù hợp với nguồn gốc gây ung thư của nó và góp phần vào tính phù hợp của nó như một mô hình để nghiên cứu các trường hợp ung thư đại tràng thiếu p53.

CCK-81 cũng đã được đưa vào các bộ sưu tập dòng tế bào ung thư chính như Bách khoa toàn thư về Dòng tế bào Ung thư (CCLE), nơi nó được phân tích trên nhiều lớp omics bao gồm biểu hiện gen, biến đổi số lượng bản sao, trạng thái đột biến và độ nhạy cảm với thuốc. Việc đưa vào các bộ dữ liệu này cho phép phân tích tích hợp về sự phụ thuộc vào con đường tín hiệu và điểm yếu điều trị trên các thể loại ung thư đại trực tràng. Ví dụ, phân tích proteogenomic đã chỉ ra rằng các dòng tế bào ung thư đại trực tràng, bao gồm CCK-81, thường biểu hiện các con đường tín hiệu bị rối loạn như Wnt/β-catenin và MAPK, khiến chúng phù hợp cho các nghiên cứu ung thư chính xác nhắm vào các trục này.

Tissue
Di căn
Disease
Ung thư tuyến đại tràng
Metastatic site
Hạch bạch huyết
Synonyms
  • CCK81

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Doubling time
45 giờ

04Identifiers

Citation
CCK-81 (Mã sản phẩm Cytion 305757)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05Expression and susceptibility

Mutational profile
Đột biến: FBXW7, Đơn giản, p.Arg465Cys (c.1393C>T), Dị hợp tử (DepMap=ACH-000963).Đột biến, PIK3CA, Đơn giản, p.Cys420Arg (c.1258T>C), Dị hợp tử (DepMap=ACH-000963). Đột biến, TP53, Đơn giản, p.Pro278His (c.833C>A), Dị hợp tử

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), chứa: 2 mM L-Glutamine, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃, chứa: EBSS (Số hiệu sản phẩm Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% FBS, 1% NEAA, 1 mM natri pyruvat
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
1 đến 3 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
62 năm
Ethnicity
Nhật Bản