Gå direkt till innehållet
CCK-81
Vävnad
Metastaserande
Sjukdom
Adenocarcinom i tjocktarmen
Metastaseringsställe
Lymfkörtel
Synonymer
CCK81

CCK-81

Cell line · Produktnummer 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen CCK-81 är en modell för humant kolorektalt adenokarcinom som härrör från en primärtumör. Den används ofta i cancerbiologiska studier med fokus på maligna tumörer i mag-tarmkanalen och har karakteriserats med avseende på olika genetiska förändringar och läkemedelsresponsprofiler. Enligt funktionell screening av tumörsuppressorer uttrycker CCK-81 muterat **TP53**, vilket bekräftats genom jästbaserade funktionella analyser, där endast cirka 6 % av kolonierna uppvisar en transkriptionellt aktiv p53-fenotyp, vilket indikerar en funktionsförlustmutation. Denna mutationsstatus stämmer överens med dess tumörbildande ursprung och bidrar till dess relevans som modell för studier av p53-defekta kolorektala cancerformer.

CCK-81 har också inkluderats i stora kompendier över cancercellinjer, såsom Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), där den har profilerats över flera omik-lager, inklusive genuttryck, variation i kopiantal, mutationsstatus och läkemedelskänslighet. Dess inkludering i dessa dataset möjliggör integrerade analyser av beroenden mellan signalvägar och terapeutiska sårbarheter över olika subtyper av kolorektal cancer. Proteogenomisk profilering har till exempel visat att kolorektala cancercellinjer, inklusive CCK-81, ofta uppvisar dysreglerade signalvägar såsom Wnt/β-katenin och MAPK, vilket gör dem lämpliga för precisionsonkologiska studier som riktar sig mot dessa axlar.

Vävnad
Metastaserande
Sjukdom
Adenocarcinom i tjocktarmen
Metastaseringsställe
Lymfkörtel
Synonymer
  • CCK81

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Fördubblingstid
45 timmar

04Identifierare

Källa
CCK-81 (Cytion-katalognummer 305757)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05Uttryck och mottaglighet

Mutationsprofil
Mutation: FBXW7, enkel, p.Arg465Cys (c.1393C>T), heterozygot (DepMap=ACH-000963).Mutation, PIK3CA, enkel, p.Cys420Arg (c.1258T>C), heterozygot (DepMap=ACH-000963). Mutation, TP53, enkel, p.Pro278His (c.833C>A), heterozygot

06Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Tillsätt 10 % FBS, 1 % NEAA och 1 mM natriumpyruvat till odlingsmediet
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 till 3 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
62 år
Etnicitet
Japanska