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CCK-81
Tissu
Métastatique
Maladie
Adénocarcinome du côlon
Site métastatique
Ganglion lymphatique
Synonymes
CCK81

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CCK-81

Cell line · Référence du produit 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire CCK-81 est un modèle d'adénocarcinome colorectal humain dérivé d'une tumeur primaire. Elle est couramment utilisée dans les études de biologie du cancer axées sur les tumeurs malignes gastro-intestinales et a été caractérisée pour diverses altérations génétiques et profils de réponse aux médicaments. D'après un criblage fonctionnel des gènes suppresseurs de tumeurs, la lignée CCK-81 exprime une mutation du gène **TP53**, comme l'ont confirmé des tests fonctionnels sur levure, avec seulement environ 6 % des colonies présentant un phénotype p53 transcriptionnellement actif, ce qui indique une mutation avec perte de fonction. Ce statut mutationnel correspond à son origine tumorigène et contribue à sa pertinence en tant que modèle pour l'étude des cancers colorectaux déficients en p53.

La lignée CCK-81 a également été incluse dans les principaux recueils de lignées cellulaires cancéreuses, tels que la Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), où elle a fait l'objet d'un profilage à travers plusieurs couches omiques, notamment l'expression génique, la variation du nombre de copies, le statut mutationnel et la sensibilité aux médicaments. Son inclusion dans ces ensembles de données permet des analyses intégrées des dépendances des voies de signalisation et des vulnérabilités thérapeutiques à travers les sous-types de cancer colorectal. Par exemple, le profilage protéogénomique a mis en évidence que les lignées cellulaires de cancer colorectal, y compris CCK-81, présentent souvent des voies de signalisation dérégulées telles que Wnt/β-caténine et MAPK, ce qui les rend adaptées aux études d'oncologie de précision ciblant ces axes.

Tissu
Métastatique
Maladie
Adénocarcinome du côlon
Site métastatique
Ganglion lymphatique
Synonymes
  • CCK81

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Temps de doublement
45 heures

04Identifiants

Référence
CCK-81 (référence Cytion 305757)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05Expression et sensibilité

Profil mutationnel
Mutation : FBXW7, simple, p.Arg465Cys (c.1393C>T), hétérozygote (DepMap=ACH-000963).Mutation, PIK3CA, simple, p.Cys420Arg (c.1258T>C), hétérozygote (DepMap=ACH-000963). Mutation, TP53, simple, p.Pro278His (c.833C>A), hétérozygote

06Manipulation et culture

Milieu de culture
EMEM (MEM Eagle), w : 2 mM L-Glutamine, w : 2.2 g/L NaHCO3, w : EBSS (numéro d'article Cytion 820100a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Ajouter au milieu 10 % de FBS, 1 % de NEAA et 1 mM de pyruvate de sodium.
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1 à 3 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
62 ans
Origine ethnique
Japonais