Gå til innholdet
CCK-81
Vev
Metastatisk
Sykdom
Adenokarsinom i tykktarmen
Metastaseområde
Lymfeknute
Synonymer
CCK81

Dokumenter

CCK-81

Cell line · Produktnummer 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

CCK-81-cellelinjen er en modell for humant adenokarsinom i tykktarmen, avledet fra en primærsvulst. Den brukes ofte i kreftbiologiske studier med fokus på ondartede svulster i mage-tarmkanalen, og er kartlagt med hensyn til ulike genetiske forandringer og legemiddelresponsprofiler. I henhold til funksjonell screening av tumorsuppressorgener uttrykker CCK-81 mutant **TP53**, som bekreftet av gjærbaserte funksjonelle analyser, hvor kun ca. 6 % av koloniene viser transkripsjonelt aktiv p53-fenotype, noe som indikerer en funksjonstapmutasjon. Denne mutasjonsstatusen samsvarer med dens tumorigeniske opprinnelse og bidrar til dens relevans som modell for studier av p53-mangelfull kolorektal kreft.

CCK-81 er også inkludert i store kompendier over kreftcellelinjer, som Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), hvor den er profilert på tvers av flere omikk-lag, inkludert genuttrykk, variasjon i kopitall, mutasjonsstatus og medikamentfølsomhet. Inkluderingen i disse datasettene muliggjør integrerte analyser av avhengigheter i signalveier og terapeutiske sårbarheter på tvers av undergrupper av tykktarmskreft. For eksempel har proteogenomisk profilering vist at kolorektale kreftcellelinjer, inkludert CCK-81, ofte viser dysregulerte signalveier som Wnt/β-katenin og MAPK, noe som gjør dem egnet for presisjonsonkologiske studier rettet mot disse aksene.

Vev
Metastatisk
Sykdom
Adenokarsinom i tykktarmen
Metastaseområde
Lymfeknute
Synonymer
  • CCK81

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Fordoblingstid
45 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
CCK-81 (Cytion-katalognummer 305757)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05Uttrykk og mottakelighet

Mutasjonsprofil
Mutasjon: FBXW7, enkel, p.Arg465Cys (c.1393C>T), heterozygot (DepMap=ACH-000963).Mutasjon, PIK3CA, enkel, p.Cys420Arg (c.1258T>C), heterozygot (DepMap=ACH-000963). Mutasjon, TP53, enkel, p.Pro278His (c.833C>A), heterozygot

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Tilsett 10 % FBS, 1 % NEAA og 1 mM natriumpyruvat til mediet
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 til 3 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
62 år
Etnisitet
Japansk