Langsung ke isi
CCK-81
Tisu
Metastasis
Penyakit
Adenokarsinoma usus besar
Lokasi metastasis
Kelenjar getah bening
Sinonim
CCK81

CCK-81

Cell line · Nomor produk 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Baris sel CCK-81 merupakan model adenokarsinoma kolorektal manusia yang diisolasi dari tumor primer. Baris sel ini sering digunakan dalam penelitian biologi kanker yang berfokus pada neoplasma saluran pencernaan dan telah dianalisis terkait berbagai perubahan genetik serta profil respons terhadap obat. Berdasarkan skrining fungsional gen penekan tumor, CCK-81 mengekspresikan mutasi **TP53**, sebagaimana dikonfirmasi oleh uji fungsional berbasis ragi, dengan hanya sekitar 6% koloni yang menunjukkan fenotipe p53 yang aktif secara transkripsional, yang mengindikasikan mutasi kehilangan fungsi. Status mutasi ini sejalan dengan asal-usul tumorigeniknya dan berkontribusi pada relevansinya sebagai model untuk mempelajari kanker kolorektal yang kekurangan p53.

CCK-81 juga telah dimasukkan dalam kompendium garis sel kanker utama seperti Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), di mana profilnya telah dianalisis melintasi berbagai lapisan omics termasuk ekspresi gen, variasi jumlah salinan, status mutasi, dan sensitivitas obat. Penggunaannya dalam dataset ini memungkinkan analisis terintegrasi mengenai ketergantungan jalur sinyal dan kerentanan terapeutik di seluruh subtipe kanker kolorektal. Misalnya, profil proteogenomik telah menyoroti bahwa garis sel kanker kolorektal, termasuk CCK-81, sering menunjukkan jalur sinyal yang terganggu seperti Wnt/β-catenin dan MAPK, sehingga cocok untuk studi onkologi presisi yang menargetkan sumbu-sumbu ini.

Tisu
Metastasis
Penyakit
Adenokarsinoma usus besar
Lokasi metastasis
Kelenjar getah bening
Sinonim
  • CCK81

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Waktu penggandaan
45 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
CCK-81 (Nomor katalog Cytion 305757)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05Ekspresi dan kerentanan

Profil mutasi
Mutasi: FBXW7, Sederhana, p.Arg465Cys (c.1393C>T), Heterozigot (DepMap=ACH-000963).Mutasi, PIK3CA, Sederhana, p.Cys420Arg (c.1258T>C), Heterozigot (DepMap=ACH-000963). Mutasi, TP53, Sederhana, p.Pro278His (c.833C>A), Heterozigot

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820100a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan ke dalam medium 10% FBS, 1% NEAA, dan 1 mM natrium piruvat
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Kepadatan penanaman
1 hingga 3 x 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
62 tahun
Etnis
Bahasa Jepang