Mine otse sisu juurde
CCK-81
Kude
Metastaatiline
Haigus
Jämesoole adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Sünonüümid
CCK81

Dokumendid

CCK-81

Cell line · Toote number 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Rakuliin CCK-81 on esmasest kasvajast saadud inimese kolorektaalse adenokartsinoomi mudel. Seda kasutatakse laialdaselt vähibioloogia uuringutes, mis keskenduvad seedetrakti pahaloomulistele kasvajatele, ning selle puhul on iseloomustatud mitmesuguseid geneetilisi muutusi ja ravimireaktsiooni profiile. Vähisupressorgeenide funktsionaalse sõelumise kohaselt ekspresseerib CCK-81 mutatsiooni **TP53**, mida on kinnitanud pärmi baasil tehtud funktsionaalsed analüüsid, kus vaid umbes 6% kolooniatest näitasid transkriptsiooniliselt aktiivset p53 fenotüüpi, mis viitab funktsiooni kaotuse mutatsioonile. See mutatsiooni staatus on kooskõlas selle tuumorigeense päritoluga ja aitab kaasa selle asjakohasusele mudelina p53-defitsiitsete kolorektaalvähkide uurimisel.

CCK-81 on lisatud ka peamistesse vähirakkude liinide kogumikesse, nagu Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), kus seda on profiilitud mitmete oomikakihtide lõikes, sealhulgas geeniekspressioon, koopiaarvu variatsioon, mutatsioonistaatus ja ravimite tundlikkus. Selle lisamine nendesse andmekogumitesse võimaldab integreeritud analüüsi signaaliteede sõltuvustest ja terapeutilistest haavatavustest kolorektaalse vähi alatüüpide lõikes. Näiteks on proteogenoomiline profiilide koostamine toonud esile, et kolorektaalse vähi rakuliinid, sealhulgas CCK-81, näitavad sageli signaaliteede, nagu Wnt/β-kateniini ja MAPK, regulatsiooni häireid, mis teeb need sobivaks täppisonkoloogia uuringuteks, mis on suunatud nendele telgedele.

Kude
Metastaatiline
Haigus
Jämesoole adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Sünonüümid
  • CCK81

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Kahekordistumisaeg
45 tundi

04Tunnused

Viide
CCK-81 (Cytioni katalooginumber 305757)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: FBXW7, lihtne, p.Arg465Cys (c.1393C>T), heterosügootne (DepMap=ACH-000963).Mutatsioon, PIK3CA, lihtne, p.Cys420Arg (c.1258T>C), heterosügootne (DepMap=ACH-000963). Mutatsioon, TP53, lihtne, p.Pro278His (c.833C>A), heterosügootne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Lisage kasvukeskkonnale 10% FBS-i, 1% NEAA-d ja 1 mM naatriumpüruvaati
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 kuni 3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
62 aastat
Etniline kuuluvus
Jaapani