İçeriğe atla
CCK-81
Doku
Metastatik
Hastalık
Kolon adenokarsinomu
Metastaz yeri
Lenf düğümü
Eş anlamlılar
CCK81

CCK-81

Cell line · Ürün numarası 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

CCK-81 hücre hattı, bir primer tümörden türetilmiş bir insan kolorektal adenokarsinom modelidir. Bu hücre hattı, gastrointestinal malignitelere odaklanan kanser biyolojisi çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır ve çeşitli genetik değişiklikler ile ilaç yanıt profilleri açısından karakterize edilmiştir. Tümör baskılayıcı genlerin fonksiyonel taramasına göre, CCK-81, maya bazlı fonksiyonel testlerle doğrulandığı üzere, mutant **TP53** eksprese eder; kolonilerin yalnızca yaklaşık %6'sı transkripsiyonel olarak aktif p53 fenotipi gösterir, bu da bir fonksiyon kaybı mutasyonuna işaret eder. Bu mutasyon durumu, tümörjenik kökeniyle uyumludur ve p53 eksikliği olan kolorektal kanserleri incelemek için bir model olarak önemine katkıda bulunur.

CCK-81 ayrıca, Kanser Hücre Hattı Ansiklopedisi (CCLE) gibi önemli kanser hücre hattı derlemelerine de dahil edilmiştir; burada gen ekspresyonu, kopya sayısı varyasyonu, mutasyon durumu ve ilaç duyarlılığı dahil olmak üzere çoklu omik katmanlar üzerinden profillenmiştir. Bu veri setlerine dahil edilmesi, kolorektal kanser alt tipleri genelinde yolak bağımlılıklarının ve terapötik zayıflıkların entegre analizlerine olanak tanır. Örneğin, proteogenomik profilleme, CCK-81 dahil kolorektal kanser hücre hatlarının sıklıkla Wnt/β-katenin ve MAPK gibi düzensiz sinyal yolakları sergilediğini ortaya koymuştur; bu da onları bu eksenleri hedef alan hassas onkoloji çalışmaları için uygun hale getirmektedir.

Doku
Metastatik
Hastalık
Kolon adenokarsinomu
Metastaz yeri
Lenf düğümü
Eş anlamlılar
  • CCK81

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

İki katına çıkma süresi
45 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
CCK-81 (Cytion katalog numarası 305757)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05İfade ve duyarlılık

Mutasyon profili
Mutasyon: FBXW7, Basit, p.Arg465Cys (c.1393C>T), Heterozigot (DepMap=ACH-000963).Mutasyon, PIK3CA, Basit, p.Cys420Arg (c.1258T>C), Heterozigot (DepMap=ACH-000963). Mutasyon, TP53, Basit, p.Pro278His (c.833C>A), Heterozigot

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Besiyerine %10 FBS, %1 NEAA ve 1 mM sodyum piruvat ekleyin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 ila 3 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
62 yıl
Etnik köken
Japonca