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CCK-81
Tessuto
Metastatico
Malattia
Adenocarcinoma del colon
Sito metastatico
Linfonodo
Sinonimi
CCK81

Documenti

CCK-81

Cell line · Codice prodotto 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare CCK-81 è un modello di adenocarcinoma colorettale umano derivato da un tumore primario. È comunemente utilizzata negli studi di biologia oncologica incentrati sui tumori maligni gastrointestinali ed è stata caratterizzata per varie alterazioni genetiche e profili di risposta ai farmaci. Secondo lo screening funzionale dei geni oncosoppressori, la CCK-81 esprime il gene mutante **TP53**, come confermato da test funzionali basati sul lievito, con solo circa il 6% delle colonie che mostrano un fenotipo p53 trascrizionalmente attivo, indicando una mutazione con perdita di funzione. Questo stato mutazionale è in linea con la sua origine tumorigenica e contribuisce alla sua rilevanza come modello per lo studio dei tumori colorettali con deficit di p53.

CCK-81 è stata inoltre inclusa nei principali compendi di linee cellulari tumorali, come la Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), dove è stata profilata attraverso diversi livelli omici, tra cui l'espressione genica, la variazione del numero di copie, lo stato mutazionale e la sensibilità ai farmaci. La sua inclusione in questi set di dati consente analisi integrate delle dipendenze dei percorsi e delle vulnerabilità terapeutiche tra i sottotipi di cancro del colon-retto. Ad esempio, la profilazione proteogenomica ha evidenziato che le linee cellulari del cancro del colon-retto, compresa la CCK-81, presentano spesso vie di segnalazione disregolate come Wnt/β-catenina e MAPK, rendendole adatte a studi di oncologia di precisione mirati a questi assi.

Tessuto
Metastatico
Malattia
Adenocarcinoma del colon
Sito metastatico
Linfonodo
Sinonimi
  • CCK81

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Tempo di raddoppio
45 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
CCK-81 (codice catalogo Cytion 305757)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Mutazione: FBXW7, semplice, p.Arg465Cys (c.1393C>T), eterozigote (DepMap=ACH-000963).Mutazione, PIK3CA, semplice, p.Cys420Arg (c.1258T>C), eterozigote (DepMap=ACH-000963). Mutazione, TP53, semplice, p.Pro278His (c.833C>A), eterozigote

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Aggiungere al terreno di coltura il 10% di FBS, l'1% di NEAA e 1 mM di piruvato di sodio
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
Da 1 a 3 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
62 anni
Etnia
Giapponese