Siirry sisältöön
CCK-81
Kudos
Metastaattinen
Sairaus
Paksusuolen adenokarsinooma
Metastaasikohde
Imusolmuke
Synonyymit
CCK81

Asiakirjat

CCK-81

Cell line · Tuotenumero 305757

The CCK-81 cell line is a human colorectal adenocarcinoma model derived from a primary tumor. It is commonly used in cancer biology studies focusing on ga...

€500.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

CCK-81-solulinja on primaarista kasvaimesta johdettu ihmisen paksusuolen adenokarsinooman malli. Sitä käytetään yleisesti ruoansulatuskanavan pahanlaatuisiin kasvaimiin keskittyvissä syöpäbiologian tutkimuksissa, ja sen geneettiset muutokset sekä lääkevasteprofiilit on kuvattu. Kasvainsuppressorigeenien toiminnallisen seulonnan mukaan CCK-81 ilmentää mutanttia **TP53**, mikä on vahvistettu hiivapohjaisilla toiminnallisilla määrityksillä. Vain noin 6 % pesäkkeistä osoittaa transkriptionaalisesti aktiivista p53-fenotyyppiä, mikä viittaa funktionaaliseen mutaatioon. Tämä mutaatiotila on yhdenmukainen sen tuumorigeenisen alkuperän kanssa ja lisää sen merkitystä mallina p53-puutteisten kolorektaalisyöpien tutkimuksessa.

CCK-81 on myös sisällytetty tärkeimpiin syöpäsolulinjakokoelmiin, kuten Cancer Cell Line Encyclopediaan (CCLE), jossa se on profiloitu useiden omiikkatasojen kautta, mukaan lukien geeniekspressio, kopioiden lukumäärän vaihtelu, mutaatiotila ja lääkeherkkyys. Sen sisällyttäminen näihin tietokantoihin mahdollistaa integroidut analyysit reittiriippuvuuksista ja terapeuttisista haavoittuvuuksista paksusuolisyövän alatyyppien välillä. Esimerkiksi proteogenominen profilointi on tuonut esiin, että kolorektaalisyövän solulinjoissa, mukaan lukien CCK-81, esiintyy usein säätelyhäiriöitä signaalireiteissä, kuten Wnt/β-kateniini ja MAPK, mikä tekee niistä sopivia näihin akseleihin kohdistuviin täsmäonkologisiin tutkimuksiin.

Kudos
Metastaattinen
Sairaus
Paksusuolen adenokarsinooma
Metastaasikohde
Imusolmuke
Synonyymit
  • CCK81

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Kaksinkertaistumisaika
45 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
CCK-81 (Cytion-tuotenumero 305757)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_2873

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatio: FBXW7, yksinkertainen, p.Arg465Cys (c.1393C>T), heterotsygootti (DepMap=ACH-000963).Mutaatio, PIK3CA, yksinkertainen, p.Cys420Arg (c.1258T>C), heterotsygoottinen (DepMap=ACH-000963). Mutaatio, TP53, yksinkertainen, p.Pro278His (c.833C>A), heterotsygoottinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Lisää elatusaineeseen 10 % FBS:ää, 1 % NEAA:ta ja 1 mM natriumpyruvaattia
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1–3 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
62 vuotta
Etnisyys
Japanilainen